文档介绍：4
大鼠组***(HIS)说明书
大鼠组***（HIS）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆
及相关液体样本中组***（HIS）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠 组***（HIS）水平。用纯化的大鼠组***（HIS） 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的 微孔中依次加入组***（HIS）,再与HRP标记 的HIS抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合 物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用 下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组 ***（HIS）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下 测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品 中大鼠组***（HIS）浓度。
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试剂盒组成:
1试剂盒组 成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
封板膜
2 片(48)
密封袋
1个
酶标包被 板
1X48
标准品：
18jig/L
瓶
标准品稀 释液
L5mlXl 瓶
酶标试剂
3mlXl 瓶
样品稀释 液
3 mlX 1 瓶
显色剂A 液
3 mlX 1 瓶
显色剂B 液
3mlXl 瓶
终止液
3mlXl 瓶
浓缩洗涤 液
(20ml X 20
倍)XI瓶
2 片(96)
一］个
1X96
2-8 ℃ 保 存
瓶
2-8 C 保 存
2・8℃保 存
6mlXlB
2・8℃保 存
6mIXl 瓶
2-8 C 保 存
6mlXl 瓶
2-8C 保
存
6mlXl 瓶
2・8℃保 存
6mlXl 瓶
2-8 C 保 存
(20ml X 30
倍)XI瓶
2・8℃保 存
样本处理及要求:
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.血清：室温血液自然凝固 10-20分钟，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
.血浆：应根据标本的要求选择 EDTA或柠檬 酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离 比、。
.尿液：用无菌管收集，离心 20分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过 程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、 脑脊液参照实行。
.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无 菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时， 用PBS （-）稀释细胞悬液，细胞浓 度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使 细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左 右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存 过程中如有沉淀形成，应再次离心。
.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一 定量的PBS, 。用液氮迅速冷冻保存
备用。标本融化后仍然保持2-8C的温度。加 入一定量的PBS （）,用手工或匀浆器 将标本匀浆充分。离心
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20分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后
一份待检测，其余冷冻备用。
.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献 进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20C保存，但应避 免反复冻融.
.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根 过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：
.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准 品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品 100",然后在第一■、第二孔中加标准品稀释 液50人 混匀；然后从第一孔、第二孔中各取 100 d分别加到第三孔和第四孔，再在第三、 第四孔分别加标准品稀释液50 d ,混匀；然后 在第三孔和第四孔中先各取 50"弃掉，再各 取50"分别加到第五、第六孔中，再在第五、 第六孔中分别加标准品稀释液 50ul,混匀；混
匀后从第五、第六孔中各取 50"分别加到第 七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标 准品稀释液50出混匀后从第七、第八孔中分 别取50"加到第九、第十孔中，再在第九第 十孔分别加标准品稀释液
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50",混匀后从第九 第十孔中