文档介绍:实验高温对植物细胞膜的伤害
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1. 实验目的
■ 学习电导仪法测定膜相对透性的方法
■ 理解逆境对植物膜透性的影响
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植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用,它的选择透性是其最重要的功能之一。
当植物受到逆境影响时,如高温或低温,干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜的透性增加,选择透性丧失,细胞内部分电解质外渗,将植物组织浸入去离子水中,水的电导将因电解质的外渗而加大,伤害愈重,外渗愈多,电导率愈大。
膜结构破坏的程度与逆境的强度、持续的时间、作物品种的抗性等因素有关。因此,质膜透性的测定常可作为逆境伤害的一个生理指标,广泛应用在植物抗性生理研究中。
本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率,来了解胁迫情况下植物受害的程度。
2. 实验原理
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伤害率
本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害
电导率 K=GQ
Q:电极常数(电导仪本身决定)
G:实测电导值
伤害率(%)=
处理电导率
煮沸电导率
×100%
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3 材料、仪器设备及试剂
(一)材料:梧桐叶片;
(二)仪器设备:
1. 电导仪;;3. 真空干燥器;
4. 恒温水浴锅;
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4 实验步骤
1) 打取叶圆片:自选叶片,洗净吸干,避开叶脉打取30个叶圆片, 放入1支试管, 再打取30个叶圆片,放入另1支试管, 依此类推, 每支试管皆放入30个叶圆片;
2) 试管分别编号为:1A,1B, 2A,2B ……5A,5B,每管加入15ml纯水, 抽真空20min;
3) 水浴处理:5组(1A1B,2A2B ……5A5B)分别在60℃水浴0,10,20,30,40min,取出后用自来水冷却10分钟;
高温处理时间(min)
CK(0)
10
20
30
40
重复1
1A
2A
3A
4A
5A
重复2
1B
2B
3B
4B
5B
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4) 测量电导率:用电导仪测定浸泡溶液的电导率(分组单独领取电导仪,详细使用方法分组指导);
5) 煮沸电导率:测过电导率的10支试管再放入100℃沸水浴中15min,以杀死植物细胞,使细胞内物质全部渗漏出来,取出试管后用自来水冷却10min,测其煮沸电导率。
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电导仪的使用方法
电源开关“开”,预热;
打开(测量/校正)拨至“测量”;(补偿/一般)拨至“一般”;(×1/×10-2)拨至“×1”;量程范围选“×103”,~。
每次往待测液中插入电极时,都要首先用纯水冲洗电极,并用吸水纸轻轻拭干。
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处理电导率Ct
A B
煮沸电导率C100
A B
伤害率
(Ct/ C100 )×100
A B
伤害率
平均值
CK(0)
10 min
20 min
30 min
40 min
5 数据记录与处理
表1 高温对叶片伤害率的影响
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