文档介绍：小鼠 B 细胞激活因子受体( BAFFR ) 酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号: E-EL-M0174 ( 本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!) 声明: 尊敬的客户, 感谢您选用本公司的产品。本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业 ELISA kit 生产技术制造。适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组 BAFFR 浓度。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分! 如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。试剂盒组成: 名称-中文名称-英文规格保存条件 ELISA 酶标板 Micro ELISA Plate 8× 12/8× 6*4℃冻干标准品 Reference Standard 2/1支*4℃标准品&样品稀释液 Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20m L /12m L*4℃浓缩生物素化抗体 Concentrated Biotinylated Detection Ab1支 120 μL /70 μL*4℃生物素化抗体稀释液 Diluent for Biotinylated Detection Ab1瓶 10m L /6m L*4℃浓缩 HRP 酶结合物 Concentrated HRP Conjugate 1支 120 μL /70 μL*4℃(避光) 酶结合物稀释液 Diluent for HRP Conjugate 1瓶 10m L /6m L*4℃浓缩洗涤液( 25×) Concentrated Wash Buffer ( 25×)1瓶 30m L /16m L*4℃底物溶液( TMB ) Substrate Reagent 1瓶 10m L /6m L*4℃(避光) 反应终止液 Stop Solution 1瓶 10m L /6m L*4℃封板覆膜 Plate Sealer 5/3 张* 产品说明书 Product Description 1份*: [96T/48T] (打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整) 检测原理: 本试剂盒采用双抗体夹心 ELISA 法。用抗小鼠 BAFFR 抗体包被于酶标板上, 实验时标本或标准品中的 BAFFR 会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠 BAFFR 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠 BAFFR 抗体与结合在包被抗体上的小鼠 BAFFR 结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB) , TMB 在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色, 加终止液后变黄。用酶标仪在 450nm 波长处测 OD 值, BAFFR 浓度与 OD 450 值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中 BAFFR 的浓度。标本收集: 1. 血清: 全血标本于室温放置 2 小时或 4℃过夜后于 1000 ×g 离心 20 分钟, 取上清即可检测, 收集血液的试管应为一次性的无热原,无内***试管。 2. 血浆: 抗凝剂推荐使用 EDTA .Na2 , 标本采集后 30 分钟内于 1000 ×g 离心 15 分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂标本。 3. 组织匀浆: 用预冷的 PBS (, pH =) 冲洗组织, 以去除残留血液( 匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果), 称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的 PBS ( 一般按 1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样本对应 9mL 的 PBS ,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在 PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于 5000 ×g 离心 5~10 分钟,取上清检测。 4. 细胞培养上清: 取细胞培养上清于 1000 ×g 离心 20 分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。 5. 其它生物标本: 1000 ×g 离心 20 分钟,取上清即可检测(具体处理方法可参考: ?tid=477 ) 6. 标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。 7. 标本收集后若不及时检测, 请按一次使用量分装, 冻存于-20 ℃/ -80 ℃冰箱内, 避免反复冻融, 1-6 月内检测,4℃保存的应在 1 周内进行检测。 8. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品最高值, 请根据实际情况, 做适当倍数稀释( 建议先做预实验,以确定稀释倍数)。试验所需自备物品: 1. 酶标仪(450nm 波长滤光片) 2. 高精度移液器, EP 管及一次性吸头: -10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL 3. 37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水 4.