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一、基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望， 进行严格的设计，并通过体外DN睡组和转 基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的 生物类型和生物产品。由于基因工程是在DN粉子水平上进行设计和施工的 额，因此又叫做DNA®组技术。
基因工程的别名
?基因拼接技术或DN睡组技术
糜作环境
?生物体外
糜作对象
?基因
糜作水平
?DNA#子水平
基本过程
?剪切一拼接-导入一表达
实质(原理)
?基因重组
结果改造的方向
?克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造
生物的遗传特性
二、基因工程的基本工具
1、限制性核酸内切酶----“分子手术刀”
2、DNA1接酶-----"分子缝合针”
3、基因进入受体细胞的载体-----"分子运输车”
(5)识别序列的特点：
“分子缝合针” 一一DNAA1接酶
(1)作用：将限制酶切割下来的 DNA>t段拼接成DN粉子。
(2)类型
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相同点：都连接磷酸二酯键
“分子运输车”一一载体
(1)载体具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一个至多个限制酶切点，供外源 DN*段插入。
③具有标记基因,供重组 DNA勺鉴定和选择。
(2)最常用的载体是质底它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核
之外，并具有自我复制能力的双链环状 DN粉子。
(3)其他载体：入噬菌体的衍生物、动植物病毒。
⑷载体的作用：
①作为运载工具，将目的基因送入受体细胞。
②在受体细胞内对目的基因进行大量复制。
【解题技巧】
(1)限制酶是一类酶，而不是一种酶。
(2)限制酶的成分为蛋白质，其作用的发挥需要适宜的理化条件，高温、强
酸或强碱均易使之变性失活。
⑶ 在切割目的基因和载体时要求用同一种限制酶，目的是产生相同的黏性
末端。
(4)获取一个目的基因需限制酶剪切两次，共产生 4个黏性末端或平末端。
⑸不同DNA分子用同一种限制酶切割产生的黏性末端都相同，同一个 DNA 分子用不同的限制酶切割，产生的黏性末端一般不相同。
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(6)限制酶切割位点应位于标记基因之外，不能破坏标记基因，以便于进行 检测。
(7)基因工程中的载体与细胞膜上物质运输的载体不同。基因工程中的载体 是DN砌子，能将目的基因导入受体细胞内；膜载体是蛋白质，与细胞膜的 通透性有关。
(8)基因工程中有3种工具，但工具酶只有2种。
Muni和限制酶 EcoRI的识别序列及切割位点分别是一 CJ
AATTG和一GJ AATTG。如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指 部位为限制酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。 适于作为图示目 的基因载体的质粒是( )
A
限制酶的应用特点
(1)在获取目的基因和切割载体时通常用同种限制酶，以获得相同的黏性 末端。但是如果用两种不同限制酶切割后形成的黏性末端相同时， 在DN地
接酶的作用下目的基因与载体也可以连接起来。
(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接，可用不同的限制酶分 别处理目的基因和载体，使目的基因两侧及载体上具