文档介绍：实验六ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察(精)
实验六ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察(精)
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实验六ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察(精)
实验六： ABO血型鉴定、血涂片的制作与血细胞显微观察
一、 实验目的
1 . 了解 ABO 和 Rh 血型分类系统的背景知识和遗传学原理
掌握微量采血及血涂片的制作方法
学****使用光学显微镜观察和区分红细胞与各种白细胞二、 实验材料
实验材料 ：医用采血针、酒精棉球、载玻片、血推片、消毒牙签
实验试剂： 瑞氏染液、抗 B 血清、抗 A 血清、生理盐水、蒸馏水
仪器设备： Motic 光学显微镜
三、实验内容和方法
1 ABO 血型鉴定
取一块清洁玻片，用记号笔标上记号。
用小滴管吸 A 型标准血清 （抗 B ）一滴加入左侧， 用另一小滴管吸 B 型标准血清（抗 A ）一滴加入右侧
以穿刺法自左手无名指指尖取血， 在玻片的每侧各放入一小滴血， 用牙签搅拌，
使每侧抗血清和血液混和。每边用一支牙签，切勿混用。
静置室温下 10 —15min 后，观察有无凝集现象，并据此判断血型。
血涂片的制作及血细胞观察
取末捎血一滴置于玻片的一端
,
左手持载玻片
,
右手以边缘平滑的推片的一
端从血滴前方后移接触血滴，血滴即沿推片散开。然后便推片与载片夹角保持
30-45
度平
稳地向前移动 ,
载片上保留下一薄层血膜
血涂片制成后可手持玻片在空气中挥动
,
使血膜迅速干燥
, 以免血细胞皱缩 .
用蜡笔在血膜两侧划线
, 以防染液溢出
,
然后将血膜平放在染色架上.
加瑞
氏
染液2-3 滴,
使覆盖整个血膜
,
固定
分钟 .
滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水
,
与染料混匀染色
5-10
分钟 .
用清水冲去染液
,
待自然干燥后或用吸水纸吸干
,
即可置血涂片于显微镜下
进行镜检。
白细胞分类计数 :
选择涂片的体尾交界处染色良好的区域
,
在油镜下计数 100
个红细胞 ,
按其形态特征进行分类计数
,
求出各类细胞所占比值。
注：
1. 瑞氏染液 : 瑞氏染料 1g
加甲醇 (AR)600ML
。将瑞氏染料放在清洁干燥乳钵中
,
加少量甲醇 ,
充分研磨使染料溶解
.
将已完全溶解的部分倒入棕色试剂瓶中
,
未溶解部
分再加少量甲醇研磨
,
直至染料完全溶解于甲醇为止.
新配制的染料偏