文档介绍：乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物学检验(GB 标准) 1 主题内容与适用范围本标准规定了乳酸菌饮料中乳酸菌检验的技术要求。本标准适用于以鲜乳、乳粉或辅以大豆等为原料,经乳酸菌发酵加工制成的具有相应风味的活性乳酸菌饮料。 2 引用标准 GB 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂 3 术语乳酸菌:一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸,需氧和兼性厌氧,多数无动力, 过氧化氢酶阴性,革兰氏阳性的无芽胞杆菌和球菌。乳酸菌菌落总数:检样在一定条件下培养后,所得 1mL 检样中所含乳酸菌菌落的总数。 4 设备和材料 温箱: 36±1℃。 冰箱: 0~4℃。 恒温水浴: 46±1℃。 电炉:可调式。 吸管:容量为 1, 10和 25mL 。 广口瓶或三角瓶:容量为 500mL 。 平皿:直径为 9cm 。 试管: 18× 180mm 。 显微镜。 5 培养基和试剂 改良 TJA 培养基( 改良番茄汁琼脂培养基)。 改良 MC 培养基(Modified Chalmers 培养基)。 % 美兰牛乳培养基。 % ***化钠肉汤。 葡萄糖肉汤。 40% 胆汁肉汤。 淀粉水解培养基。 精氨酸水解培养基。 乳酸杆菌糖发酵管。 七叶苷培养基。 革兰氏染色液:按 GB 规定执行。 3% 过氧化氢溶液:按 GB 规定执行。 蛋白胨水、靛基质试剂:按 GB 规定执行。 明胶培养基:按 GB 规定执行。 ***盐培养基、***盐试剂:按 GB 规定执行。 生理盐水:定量分装于三角瓶和试剂管内灭菌。 6 乳酸菌菌落总数的测定 检验程序乳酸菌菌落总数检验程序如下: (略) 操作步骤 以无菌操作将经过充分摇匀的检样 25mL( 或 25g) 放入含有 225m L 灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成 1∶ 10 的均匀稀释液。 用 1mL 灭菌吸管吸取 1∶ 10 稀释液 1mL , 沿管壁徐徐注入含有 9mL 灭菌生理盐水的试管内( 注意吸管尖端不要触及管内稀释液)。 另取 1mL 灭菌吸管,按上述操作顺序,作 10 倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用 1支 1mL 灭菌吸管。 选择 2~3 个以上适宜稀释度, 分别在作 10 倍递增稀释的同时, 即以吸取该稀释度的吸管移 1mL 稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。 稀释液移入平皿后,应及时将冷至 50℃的乳酸菌计数培养基( 改良 TJA 或改良 MC) 注入平皿约 15mL ,并转动平皿使混合均匀。同时将乳酸菌计数培养基倾入加有 1mL 稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对照,以上整个操作自培养物加入培养皿开始至接种结束须在 20min 内完成。 待琼脂凝固后,翻转平板,置 36±1℃温箱内培养 72± 3h 取出,观察乳酸菌菌落特征( 见表 1) ,选取菌落数在 30~ 300 之间的平板进行计数。计算后, 随机挑取 5 个