文档介绍：实验放线菌的形态观察主讲人:袁建赣南昌大学生物技术系 1一、目的?辩认放线菌的营养菌丝、气生菌丝、孢子丝、孢子的形态; ?学****掌握水封片法、玻璃纸法、影印法制作放线菌涂片。 2二、原理?放线菌的菌丝分化为两部分,即长入培养基内的营养菌丝(又称基内菌丝)和生长于培养基表面的气生菌丝(又称繁殖菌丝)。?有些放线菌的气生菌丝分化成各种孢子丝,其形状和分支都不同,孢子形状也不相同。这些特征是识别放线菌和分类的重要依据。?放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似, 后期形成孢子菌落呈粉状、干燥,有各种颜色呈同心圆放射状。 3 放线菌纲中几种带孢子结构的显微照相。(a)链霉菌,单轮生类型。(b)链霉素,螺旋形类型。菌丝体宽度均约为 μm。 4三、材料、试剂与器具?1、材料细黄链霉菌( Streptomycs microflavus )又称 5406 放线菌斜面菌种,棘孢小单孢菌( Micromonospora echinospora )斜面菌种,高氏 1号平板。?% 美蓝染色液,石炭酸复红染色液,无菌水?2、器具显微镜,载玻片,镊子,接种环,玻璃刮,玻璃纸等。 5四、操作步骤?1、水封片观察?(1)取一套高氏 1号平板,将菌种划线方法接种, 把灭菌过的盖玻片斜插在培养基中,一半露出, 在28℃下培养 5~7d备用。?(2)取一滴美蓝染色液置于载玻片中央,将上述长有菌丝的盖玻片取出,把一面的培养基擦净。然后把长菌丝一面朝下,盖住染色液,制成水封片,用高倍镜观察其气生丝、孢子丝和孢子。 6 ?影印法观察: ?用涂却法或划线法培养出单个菌落,然后用小刀小心地刮一个菌落,翻过压印在载玻片中央,小心地移开菌落,载玻片中央就留下菌落印痕。在火焰下固定,滴一滴石碳酸复红染色 1min ,水洗后晾干,在高倍镜,或油镜下观察。 7 ?插片法:倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图?压印法:倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图?埋片法:倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图 8五、注意事项?1、放线菌生长较慢,培养时间较长,所以在接种和培养时要注意无菌操作,严防杂菌无染。 9 ?六、实验报告?1、绘图,比较这两种放线菌的形态特征的异同。?2、比较这两种方法的优缺点。 10