文档介绍：会计学
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培训酶联免疫吸附试验(shìyàn)ELISA操作注意事项
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酶免疫测定类型(lèixíng)
这种固相酶免疫测定(cèdìng)方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(cèdìng)（Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay），简称ELISA。
酶免疫(miǎnyì)技术
酶免疫组化
酶免疫测定
均相酶免疫测定
非均相酶免疫测定
固相酶免疫测定
液相酶免疫测定
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ELISA原理（以一步法双抗体(kàngtǐ)夹心法测抗原为例）
ELISA其原理为抗原抗体特异性结合和抗原抗体的酶标记，以酶催化底物显色来判断(pànduàn)结果。
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影响酶联免疫测定的因素较多, 诸如标本的采集保存、试剂的准备、加样的技术、孵育温度的控制、洗涤反应板的方式、显色反应时间的控制等一系列问题均有可能对试验结果(jiē guǒ)产生很大的影响, 只有避免了这些因素, 才能保证试验结果(jiē guǒ)的准确性和可靠性。
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一、移液枪的使用(shǐyòng)
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1. 样品(yàngpǐn)准备
（1） 吸样之前要保证移液枪、枪头和液体处于(chǔyú)相同温度。置于冰箱保存的样品应提前取出，室温放置，使温度平衡后再吸样。
液体温度 > 吸头温度的 移取的液体体积会 偏大
液体温度 < 吸头温度的 移取的液体体积会 偏小
（2） 若溶剂瓶中液体太少，可倒入EP管中，方便吸取。
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2. 体积(tǐjī)设定
大体积 小体积 逆时针 精度最佳(zuì jiā)
小体积 大体积 顺时针 调至超过设定刻度，再回调
可保证最佳(zuì jiā)的精确度
严格的精确(jīngquè)调节方法
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3. 装枪头(qiānɡ tóu)
将移液枪端垂直插入吸头，左右微微(wēiwēi)转动，上紧即可
上下敲击会引起内部的零部件因瞬间(shùn jiān)强烈撞击而松散，
甚至会导致调节刻度的旋钮卡住
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4. 吸液
（1） 垂直(chuízhí)吸液，枪头吸嘴尖端需浸入液面2-4mm以下。
（2） 枪头吸嘴预润湿（2-3次），使吸嘴内壁液体吸附达到饱和，再吸入样液，最后打出液体的体积会很精确。
一般液体，正向吸液（一档二档）。
粘稠液体和易挥发液体，可反相吸液（二档一档）。
正向(zhènɡ xiànɡ)吸液
反向(fǎn xiànɡ)吸液
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（3） 缓慢吸取，控制好弹簧的伸缩速度。吸液速度太快会产生反冲和气泡，导致移液体积不准确和腐蚀枪体。
（4） 吸取后将移液枪提离液面，停约一秒钟，观察是否有液滴缓慢地流出。若有流出，说明有漏气现象（原因有：枪头未上紧；枪头不匹配(pǐpèi)；移液枪内部气密性不好）。
（5） 吸嘴外壁残留液滴可沿壁靠去或用滤纸蘸擦。
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