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AD494(DE3)大肠杆菌菌株使用说明.doc

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AD494(DE3)大肠杆菌菌株使用说明.doc

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AD494(DE3)大肠杆菌菌株使用说明.doc

文档介绍

文档介绍:AD494(DE3)大肠杆菌菌株
编号
名称
北京华越洋生物NRR01260
AD494(DE3)大肠杆菌菌株
基本信息:
名称:AD494(DE3)大肠杆菌菌株
规格:300ul甘油菌
储存温度:-80°C
基因组:
D (ara-leu)7967f lacX74f phoAPvuII, phoR; malF3, trxB::Kan 简介:
AD494 菌株来源于 K12 菌,AD494 菌株含有 thioredoxin reductase
(TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确
的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxin
reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨节或者 其他非卡那霉素抗性的质粒,进行基因蛋白表达。
操作说明:
本品包含一份甘汕菌,使用本廿油菌时可以不用完全融解,在廿汕菌表 面薩取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数 的增加,细菌的活力会逐渐下降。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽皐先划平板,然后再挑单克隆 菌落进行后续操作。
冷冻管开封:
用浸过75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
菌株复溶:
无菌讣境中旋开装有复溶液的滴瓶盖,吸取1ml左右复溶液,加入到冷冻 管中。轻轻振荡,使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮:
用无菌吸管吸取菌悬液,转移到复溶液滴瓶中。做好标识,在适宜温度下培 养。细菌在30-35"C培养箱中培养24-48h,真菌在23-28°C培养箱中培养24-72h (必要时,可适当延长培养时间)。
菌株传代:
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中(尽量 增大接种量:如用无菌吸管吸収N50M新鲜培养物至固体培养基,边移动边缓 慢释放),适宜温度下培养,用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
注意事项:
1、 菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长吋