文档介绍:?坎坎坷坷细胞生物学实验生命科学学院实验一细胞形态、细胞器的显微结构的观察一、实验目的 ,掌握光学显微镜的使用方法。 。二、实验原理细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞是多种多样的。要对细胞进行研究,首先要从其形态结构人手。所以,要借助显微镜的成像及放大原理,在显微镜下,才能观察到细胞的基本形态结构。?经物镜形成倒立实像,经目镜进一步放大成像。?显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数,还与显微镜的分辨力有关。?制作光学镜头所用的玻璃折射率为 ~ ,所用介质的折射率越接近玻璃的越好。对于干燥物镜来说,介质为空气,镜口率一般为 ~ ;油镜头用香柏油为介质,镜口率可接近 。?普通光线的波长为 400 ~700nm ,因此显微镜分辨力数值不会小于 μ m,人眼的分辨力是 ,所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X 。显微镜的分辨率: 也称为分辨力,它是指能把两个物点辨清的最小距离, 分辨距离越大,则分辨率越低。所以,分辨率是以分辨距离来表示的。其计算公式为: D= λ/N·A N ·A·=n·sina/2 式中 D 为分辨率, A 为光波波长, n= 介质折射率; α= 镜口角(标本对物镜镜口的张角), N·A· 为物镜的数值孔径( 镜口率)。镜口角总是要小于 180 ?,所以 sina/2 的最大值必然小于 1。在物镜上,有镜口率(.) 的标志,它反应该镜头分辨力的大小,其数字越大,表示分辨率越高,各物镜的镜口率如下表: 物镜镜口率(.) 工作距离(mm) 10 × 40 × 100 × 显微镜的总放大倍数等于目镜和物镜放大倍数的乘积, 公式为: M = K1xK2 焦点深度: 显微镜调焦到看清标本某一点时,不仅是这一物点,而且它的上下两侧也能看清楚两侧的厚度叫做焦点深度。看到标本的全厚度,必须调节螺旋仔细地从上到下进行观察。厚标本和薄标本厚标本和薄标本 4 - 5 um 4 - 5 um 2um 2um 基础知识基础知识三、显微镜概述显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。 3部分构成: ①照明系统:包括光源和聚光器。②光学放大系统:由物镜和目镜组成, 是显微镜的主体。③机械装置:用于固定材料和观察方便, 包括镜台(载物台) 、调节器和、物镜转换器(旋转器)等。尼康 E-600 显微镜