文档介绍：第四章 遗传的分子基础
§ DNA的提取和鉴定
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1. 了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。
2. 尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取及鉴定。
3. 培养实事求是的科学态度和探索精神。
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，思路和鉴定原理
是什么？
？
不同？
何控制其溶解和析出？
？
认真阅读教学案,思考以下问题：
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NaCl
1．DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_____溶液中
溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使
DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离
目的。此外，DNA不溶于_____溶液，但是细胞中的某些
蛋白质则溶于_____。利用这一原理，可以将DNA与蛋白
质进一步的分离。
2．蛋白酶能水解_____，但是对_____没有影响。大多数
蛋白质不能忍受60—80oC的高温，而DNA在________才会
变性。洗涤剂能够瓦解________，但对DNA没有影响。
3．在______条件下，DNA遇______会被染成___色，
因此二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
酒精
酒精
蛋白质
DNA
80oC以上
细胞膜
沸水浴
二苯***
蓝
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实验思路
§ DNA的提取和鉴定
DNA从哪
提取？
怎样将DNA与
细胞中的其他
物质分离？
怎样鉴定
我们提取
的DNA？
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【实验原理】
，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
，DNA遇二苯***（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯***可以作为鉴定DNA的试剂。
2mol/L
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【实验材料】
1、鸡血细胞液（5~10ml）；
2、体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；
3、蒸馏水；
4、质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸钠溶液； （抗凝剂）
5、物质的量浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的NaCl溶液；
6、二苯***试剂。
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【实验过程】
制备鸡血细胞液
过滤含有DNA的***化钠溶液
提取含杂质较少的DNA
DNA的鉴定
析出含DNA的粘稠物
滤取含DNA的黏稠物
再溶解DNA的黏稠物
提取鸡血细胞的核物质
溶解滤液中的DNA
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课前制备：鸡血细胞液
，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长
:
，材料易得
:
：新鲜的猪血
新鲜的鸡血
原则上只要含DNA的生物材料都可以，但是选取DNA含量相对较高的生物组织，成功率更大。
（×）
（√）
→哺乳动物成熟红细 胞无细胞核，DNA含量极少不易提取
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：
取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。注入新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。（也可以将血液倒入离心管内，用1000r/min（转每分）的离心机离心2min，血细胞沉淀于离心管底部。
实验时，用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。）
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