文档介绍:摘 要
背景
苯(benzene) 是一种广泛使用的化学原料和有机溶剂,长期低浓度苯暴露可能损害造
血系统甚至导致白血病。利用生物监测可以全面反应机体的实际接触情况,为了有效识别、
评价苯的职业暴露水平,美国、德国、新加坡等发达国家根据本国苯的环境限值标准,已
经先后研制了苯的生物限值标准。苯的生物代谢产物包括酚类、反-反式粘糠酸(t,t-MA)
和苯巯基尿酸(S-phenylmercapturic acid ,S-PMA)等,S-PMA是苯的特异性代谢产物之
一,其作为苯的生物标志物受到普遍认可。为保护职业接苯人群的身体健康,我均容许浓度(PC-TWA)为6mg/m3,根据环境暴露限值探讨研制符合
我国实际情况的生物接触指标的检测方法及生物接触限值标准已经提到议事日程。
目的
根据高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)的基本分析原理
和S-PMA理化性质,探讨运用HPLC法检测尿中S-PMA的尿样预处理方法及色谱柱类型、
柱温、流动相、检测波长等色谱条件的具体选择,为开展苯的职业暴露生物监测提供方法
学依据;在HPLC法测定尿中S-PMA的方法学研制基础上,通过对苯的环境监测数据与尿
中S-PMA的测定浓度进行相关分析,结合我国目前苯的环境暴露限值(PC-TWA=6mg/m3),
提出我国职业苯暴露生物监测的S-PMA生物接触限值和应用条件。
方法
选择非职业接触苯及非吸烟的学生作为本次研究所用尿样基质,根据测定分析目的在
尿样基质中加入相应浓度的 S-PMA 储备液,运用合适的预处理方法,采用 Shim-pack
VP-ODS 色谱柱、35℃柱温、205nm 紫外检测波长和混合流动相等色谱条件对样品中的
S-PMA 进行定性定量分析。配制不同浓度 S-PMA 标准系列,通过制作标准曲线,求证测
定方法测定 S-PMA 的浓度线性范围;配制三种浓度的 S-PMA 尿样,通过加标回收检测,
计算本方法的回收率;通过不同时间测定平行样品的 S-PMA 浓度,计算本方法的精密度。
将尿样放置于不同温度环境中,于放置前、放置后 3 天、7 天和 14 天对尿样中的 S-PMA
进行测定,计算其稳定性。
选择 32 名职业接触苯的工人作为研究对象,对研究对象的环境暴露水平进行个体采
样,收集研究对象班末尿样,通过 HPLC 法测定尿样中 S-PMA 浓度,通过环境苯浓度与
尿液 S-PMA 浓度相关回归分析,结合我国目前苯的环境暴露限值(6mg/m3)计算符合我
国情况的 S-PMA 生物接触限值。
结果
S-,所建立的标准曲线在S-PMA的质量浓度为40~
2000µg/L时线性关系良好(r=),检测限40µg/L,%~%,
%~%%~%。将尿样放入冰箱前
I
当天、放入后第3天、第7天及第14天,计算4℃及-20℃条件下保存的尿样S-PMA的相对标
%%。
32 名职业接苯工人空气样品个体采样检测数据显示,空气苯的平均浓度为
(.±)mg/m3。32名工人尿中的S-PMA浓度为(.±)μg/g Cr;将班末尿
S-PMA与个体接苯水平建立直线回归方程为:Y(μg/g Cr)= X(mg/m3)+,(n=32,
r=,P<)。结合我国目前苯的环境暴露限值为6mg/m3,计算的S-PMA生物接触
Cr。
结论
1. HPLC法测定尿中S-PMA的色谱条件为:采用C18柱进行分离,以乙腈作为流动相A,
乙腈-甲醇-三乙胺为流动相B进行梯度洗脱,流速2ml/min,柱温35℃,紫外检测波长205nm;
2. HPLC法测定尿中S-PMA的色谱行为、最低检测限、