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Protein A Sepharose 4FF 产品使用说明书
高IgG结合特异性 高流速 低蛋白A脱落
产品特点
特点
结合特异性强，
团脱落少
基
颗粒大小
50-160 pm
基质
4%的交联琼脂糖
凝胶
推荐流速
50-300cm/h
配基
重组 protein A
使用温度
常温
配基密度
6mg 重 组 蛋
A/mI
白
pH 范围
3-i0
动态吸附载量
60mg人 IgG/ml
保存温度
+4~8C
蛋白 A 残留
小 于 3ng 蛋
A/mg IgG
白
保存液体
20%乙醇
产品介绍
Protein A sepharose 介质是经过我们公司长期开发，在公司生产的 native protein A 的
基础上精致而成。通过 Protein A Sepharose 4FF ，可分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的 抗体或包含抗体 Fc 片段的基因工程重组蛋白。本产品相对同类产品具有如下优势：
1、 偶联条件温和，更好的保持了 protein A 的构象，所以抗体载量高，同体积的介质，相 同规模的纯化设备， 相同体积介质， 抗体的产量明显高于用同类产品， 大大的降低了抗体药 物生产成本。
2、 非常稳定，不易脱落，用其生产的抗体中 protein A 的残留比同类产品的更少。
3、 公司的 Protein A 以及 Protein A sepharose 的生产都是在清洁车间生产，符合制药企 业生产需求。
4、 公司生产的 Protein A sepharose 使用寿命长，常规条件下能够重复使用 100 次以上。
使用说明
（1）缓冲液的准备：
平衡缓冲液： 纯化不同动物和不同亚型抗体 平衡缓冲液成分
时所用平衡缓冲液是不同的，部分参照如
下：
抗体种类
人 IgGi、人 lgG2、小鼠 |gG2a、小鼠 |gG2b 10mM 磷酸盐缓冲液， 150mM NaCI , pH
人 IgG3、人 lgG4、小鼠 IgGi、大鼠 IgG3 50mM Tris-CI ， 3M NaCI， -
（2）样品的准备
样品上柱前先用平衡缓冲液稀释 5至10倍，从而确保样品液的成分和 pH与平衡缓冲液相近。 如果上样体积过大， 可以采取调节上样液 pH和盐浓度的方式，使样品的pH和电导与平衡液 接近，使样品中的缓冲体系与平衡缓冲液相同。
细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰， 去血清处理或稀释样品将提高
纯化抗体收率。
样品在上柱前也需 。
（3 ）操作步骤
a） 填料装柱后，用纯水流洗至少 3个柱管体积，以冲掉乙醇，再用平衡缓冲液流洗至少 5
个柱管体积来平衡柱子。
b） 将样品上柱，上样流速控制在 60cm/h。
c） 平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积，把 UV洗至基线。
d） 洗脱缓冲液洗脱，收集洗脱峰，立即用中和缓冲液中和到中性。
e） 再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5