文档介绍：第三军医大学
博士学位论文
新型放射增敏剂CpG ODN107的临床前药代动力学研究
姓名:岑彦艳
申请学位级别:博士
专业:药理学
指导教师:周红
2012-11
新型放射增敏剂的临床前药代动力学研究摘要脑胶质瘤鞘澜缟戏⒉÷首罡叩哪灾琢觯⒉÷饰J蚍种S捎脑恶性胶质瘤浸润性很强,手术切除率很低,术后高复发,临床上的标准治疗方法是采用手术切除加术后放射治疗。但是,由于大多数胶质瘤对放射线不敏感或者放射治疗一段时间后对放射线的敏感性降低,即使提高照射剂量仍不能取得满意疗效。因此,研制高效的放射增敏剂,增加射线对肿瘤细胞的杀伤作用,对提高脑胶质瘤的治愈率、延长生存期具有重要意义。含有未甲基化墓押塑账崞是具有免疫激活作用的寡核苷酸,有文献报道,梢蕴岣叻伟⒍裥阅越质瘤组织对化疗和放疗的敏感性,可增加单次放疗和分次放疗巾射线对肿瘤的杀伤作用,具有化疗和放射增敏作用。含个碱基的硫代寡核苷酸一是本实验室经早期筛选的对肿瘤有放射增敏作用的在体内、外的药效学研究均表明联合射线可抑制肿瘤生长,诱导脑胶质瘤细胞自噬性死亡,延长动物生存时间。作为治疗脑胶质瘤新型放射增敏剂,合成方法简单、毒性低、质量可靠、放射增敏效果显著,研发成功将为脑胶质瘤患者带来福音,并将产生巨大的社会效益和本研究项目是国家“重大新药创制”科技重大专项“放射增敏剂候选药物的研究”—的重要研究内容之一,通过研究在动物体内的吸收、分布、代谢、排泄过程,阐明其在动物体内的药代动力学特征,为该药物的药效学、毒理学研究以及临床新药报批提供资料,同时也为其他此类化合主要研究内容与方法:一、生物样品中及其代谢物的检测方法建立通过优化和改良色谱和质谱条件,建立高效液相色谱一三重四级杆质谱联用狹疢的方法测定血浆中经济效益。物的药代动力学研究提供方法参考和新的研究思路。及其代谢物此醵绦蛄一’、第二军医人学博十学位论文,疌
在四个给药剂量是否存在虶。。依赖于成汁;生物样品经处理后—/测定药物的浓度,研究捌浯晃锏腖狹疢觳夥椒ń⒑腿分疦一’呐ǘ龋⒔蟹椒ㄑ分ぃǚ椒ǖ淖ㄊ粜浴⒘槊舳取⒍肯咝苑围、日内及同间精密度、准确度、回收率、样品稳定性和基质效应的考察。在此基础上,针对不同生物样本,如尿、粪、胆汁和组织均浆液,进行药物提取方法的再优化,建立不同生物样品中药物浓度的测定方法,并进行部分方法学确证。捌浯晃锏难=ρ卣描绘小鼠单次静脉注射四个剂量.、和/腃R┡度一时间曲线图,以及小鼠单次静脉注射/拇晃锏难R┡ǘ一时间曲线图,采血时问点为给药前和给药后煌ü渴夷P湍夂虾屯臣矩的方法计算在四个给药剂量以及代谢物在/给药剂量下的相关药代动力学参数;确定姆植继卣①选择高、中、低三个剂量浓度的药物分别与空白小鼠、人血浆以及人血清白蛋白、等孵育,采用超过滤法,经—/检测含量,研究与不同种属血浆蛋白的结合情况;②选择/剂量组,小鼠尾静脉注射给药,在给药后λ溃馄剩崛「巍⑿摹⒛浴⑵ⅰ⒎巍⑸觥⒊Α⒓∪狻生殖腺等重要组织、器官药物,—/药测定物浓度,研究织器官中的分布特征;③脑内注射荧光标记的像方法研究谀灾械姆植继卣鳌呐判固卣选择/的给药剂量,经尾静脉注射,在小鼠体内分段收集姆唷⒛颍选择/的给药剂量,经尾静脉注射,在大鼠体内分段收集姆唷⒛蚝偷在尿、粪和胆汁中的排泄特征。主要研究结果:优化了的提取方法,血浆、尿、粪、胆汁样本经酚仿液一液萃取结合固相萃取提第二饺搜Р┦垦宦畚二、比增高的线性药代动力学。三、在各组,通过小动物活体荧光成四、一、生物样品中及其代谢物的—/测定条件:改进在血浆和组织中
以个罨钩傻牧虼蛄形D诒辏砸译妫.%氨溶液A鞫啵析柱为愿叽康F魑8稍锲珽源负离子扫描,觳夥绞浇屑觳狻在血浆中~/浓度范围内线性关系良好,在尿、胆汁中/浓度范围内线性关系良好,在组织中/ǘ确段谙咝怨叵盗己谩’、、一—闹执晃镌血浆中⒁/浓度范围内线性关系良好。本方法专属性强、线性关系良好,灵敏度、精密度、准确度均符合《化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则》的要求,可进行体内药物分析。约按晃锏难=ρ卣小鼠单次静脉注射四个剂量.、和后,经件进行房室模型拟合,结果表明在小鼠体内药动学过程符合静脉注射的三室模型;统计矩法计算得到平均滞留时间。....痬/;,谛∈筇迥诔氏址窍咝远ρУ奶卣鳌小鼠单次静脉注射后,.、和./,畉直鹞、.2捎肁疉硎敬谢物相当量,一’、疦一—直鹞.%,ィ.%①采用超滤法分别测定了与人、小鼠血浆以及人血浆白蛋白的蛋白结合率,结果表明与各种属来源的血浆蛋白结合率均较高与慕岷下%,说明在人血浆中主要与白蛋白结合,并且随着药物浓度的增加,与白蛋白的结合出现饱和现象。②小鼠