文档介绍：HPV临床常用检测方法
HPV临床常用检测方法
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HPV临床常用检测方法
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由于 HPV不能在体外细胞培养， 故不能用简便的血清血检测进行 HPV的诊断和分型。 临床上
用于检测 HPV 的方法包括细胞学方法、免疫组化、原位杂交、斑点杂交、核酸印迹和 PCR
等，其中以 PCR方法的敏感性最高，是目前应用最多
感染的 HPV型别、含量、持续时间决定病变的发展与预后 , 是进行 HPV检测的主要内容。
目前主要是通过应用分子生物学方法进行 HPV DNA的检测。
1、现有的 HPV实验室主要检测手段 :
① 聚合酶链反应 (PCR, Polymerase Chain Reaction): 扩增位于两段已知序列之间的
DN***断的方法。该法有较高的敏感度 , 可进行 HPV分型 , 缺点是对实验室环境要求较高 , 容
易发生样本间的交叉污染 , 从而导致假阳性率高。
② 核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度 , 还可以进行 HPVDNA的分型 , 各种核酸杂交检测方法有一定的
优缺点。
核酸印迹原位杂交
适用于 HPV分型和 HPV DNA分子量鉴定 , 虽然灵敏度高 , 但因操作复杂 , 需要新鲜组织标
本, 不便在临床上大规模使用。 B 斑点印迹
其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法 , 虽然经济实用 , 但实验过程存在有放射
性污染 , 是环保所不能轻视的问题。
C原位杂交（ in situ hybridization ，一种核酸杂交技术，可用来测定基因或特定核
苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体 DNA） 通过非放射性探针对石蜡组织进行检
测, 能作定位检测 , 假阳性率低 , 但灵敏度不高 , 大大降低了临床使用价值。
D杂交捕获法 (Hybrid Capture)
杂交捕获试验是利用化学发光对抗体捕获的信号加以放大。 首先使 DNA双链释放并分解
成为可以杂交的核苷酸单链 ,DNA单链与 RNA组合探针结合为 RNA-DNA杂合体 , 特异性抗体将
RNA-DNA杂合体捕获 , 偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与 RNA-DNA杂合体结合 , 碱性磷酸酶使酶
底物发光 , 根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量 , 从而确定 RNA-DNA杂合体的含量。 能检测
种高危型 HPV,包括 HPV16、18、 31、33、 35、39、 45、51、 52、56、 58、59、 68。
各种检测方法的比较
各种检测方法的比较
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HPV临床常用检测方法
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方法学
灵敏度
特异性
技术特点
细胞学（ Cytology
）
低
低
操作容易，成本较低，准确度较差
斑点印迹（ Dot blot
）
中
中
有一定放射性
核酸印迹原位杂交（ southern