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实验过氧化氢酶活性测定.ppt

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实验过氧化氢酶活性测定.ppt

上传人:文库新人 2021/11/25 文件大小:592 KB

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实验过氧化氢酶活性测定.ppt

文档介绍

文档介绍:实验过氧化氢酶活性测定
第一页,课件共10页
一 实验目的
掌握和学****测定过氧化氢酶活性的原理和方法;
2 了解过氧化氢酶的作用。
第二页,课件共10页
二 实验原理
过氧化氢酶(catalase)属于血红蛋白酶,含有铁,它能催化过氧化氢分解为水和分子氧,在此过程中起传递电子的作用,过氧化氢既是氧化剂又是还原剂。可根据H2O2的消耗量或O2的生成量测定该酶活力大小。
第三页,课件共10页
在反应系统中加入一定量(反应过量)的过氧化氢溶液,经酶促反应后,用标准高锰酸钾溶液(在酸性条件下)滴定多余的过氧化氢。即可求出消耗的H2O2的量。
反应式
5H2O2+2KMnO4+4H2SO4
5O2+2KHSO4+8H2O+2MnSO4
第四页,课件共10页
三 实验器材
10%H2SO4;
mol/L ;
KMnO4标准液:称取KMnO4(AR),用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000mL, 草酸溶液标定;
H2O2:取30%H2O2 (),稀释至1000mL, KMnO4溶液(在酸性条件下)标定。
1 试剂
第五页,课件共10页
2 材料:小麦叶片
3 主要设备:离心机,恒温箱,酸
式滴定管
第六页,课件共10页
四 方法步骤
1、 酶液提取
,研磨成匀浆,转移至25ml容量瓶中,用该缓冲液冲洗研钵,并将冲洗液转至容量瓶中,用同一缓冲液定容,4000转离心15min,上清液即为过氧化氢酶的粗提液。
第七页,课件共10页
2 、滴定:取50mL三角瓶3个(2个测定,另1个为对照),,, H2O2 ,同时计时,