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葡聚糖凝胶lh-20sephadexlh-20使用说明书.doc

文档介绍

文档介绍:葡聚糖凝胶 LH-20 Sephadex LH-20使用说明书
中文名称: 葡聚糖凝胶 LH-20
英文名称:Sephadex LH-20;Cross-inked dextran gel LH-20
其他名称:交联葡聚糖凝胶LH-20;交联右旋糖酐凝胶LH-20
产品说明:颗粒大小:干粉18-111μm;最高流速:720cm/h;分
离范围(球蛋白):100-4000; 可用于分离胆固醇,脂肪酸,激素,
维他命,天然产物等。
储存条件:室温 保质期5年
结构成分:交联右旋糖酐
排阻极限:4~5KD(与所用溶剂有关)
颗粒直径:18~111um
球蛋白分离范围:100~4000
操作温度:4~40℃
性状:白色珠粒或粉末,属亲脂性凝胶。是由葡聚糖G-25羟丙基化加工而成,属于分子筛凝胶
用途:生化研究。适用于凝胶过滤,天然产物在有机溶剂中的纯化。例如:类固醇、萜类、脂类以及小分子多肽等,葡聚糖凝胶LH-20同时适用于分子类别非常相似的物质的分离和工业规模的制备,既可用于初步纯化步骤,也可以用于最终精制步骤,如非对映同分异构体的分离
简介:
Sephadex G型葡聚糖凝胶只适合在水中使用,Sephadex G-25羟丙化后就是Sephadex LH-20。此君既有分子筛作用,在由极性与非极性溶剂组成的溶剂中还有反相层析效果。虽然价位很高,但由性能颇佳,可再生利用,所以倍受钦睐。此外上柱样品损失很少,对处理小样品较好,这也是我们实验室常用的原因之一。
Sephadex LH-20适合用于有机溶剂分离嗜脂性分子,天然产物在有机溶剂中的纯化。可以非常经济的大规模制备各种天然产物,尤其在中药有效成分提取中作为大孔吸附树脂解析物的纯化。 

结合凝胶过滤﹑分配色谱及吸附层析于一身,能分离结构相近的分子。因此使用中要考略几种色谱的作用机制。
最高载量可达250mg样品/ml凝胶﹑极少需要再生﹑使用得当,分离效果可保持不变。上样量视被分离物的结构性能的差异而定:差异大,则大;差异小,则小。凝胶过滤的上样量一般为5-7%的床体积,我们建议初次上样量控制在1-2%的床体积,视分离情况可以逐步增加;柱高的选择也与分离要求相关――难分物质要有一定柱高和流速控制;流动相可参考TLC的条件,正确的流动相可以提高分离度并缩短分离时间。
流动相的常用溶剂为:水 甲醇 *** 乙酸乙酯 二***甲烷
上述溶剂的极性依次降低,对带有极性的被分离物而言,保留值和分离度依次递增;同理选用的凝胶柱高可依次降低,流速可以增大(或上样量可以增加,树脂体积在低极性溶剂中明显收缩)。

溶剂的溶解性,极性,沸点,毒性都是要考虑到的。 
二***甲烷通常对被分离物质间的极性和碱性差异比较小时采用。甲醇通常对带环状(包括苯环)物质分离采用,葡聚糖凝胶对环状物质有强烈吸附。
使用方法:将干粉浸泡于60—70%乙醇中过夜(充分搅拌),洗去可能存在的残留物,抽干然后湿态装柱,动态用一倍柱体积的60—70%乙醇淋洗,再用水洗净乙醇即根据自己选用的流动相体系平衡、上样 
原理:
Sephadex LH20的分离原理是根据分子大小,主要有两方面:以凝胶过滤作用为主,兼具反相分配的作用(在反相溶剂中)。因为凝胶过滤作用,所以大分子的