实验一大肠杆菌的分离和培养课件.ppt

文档介绍：实验一大肠杆菌的分离和培养
试验目 :
扩增, 利用液体培养基进行细菌培养 操作。
分离, 用固体平面培养基础进行细菌 划线培养。
条件和试验原理。
一、基础知识
(一)微生物:
: 结构都相当简单,, 有 .

病 毒
细 菌
放线菌
真 菌
原生动物
(二)培养基
(按物理形态分)
(1)液体培养基
(2)固体培养基
常见 固体培养基:
琼脂固体培养基.
②微生物在固体培养基
表面生长,能够形成
肉眼可见 菌落.
基础物质
(1)水
(2)碳源
(3)氮源
(4)无机盐
其她条件
(1)pH值
如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性
(2)特殊营养物质---- ?
如: 培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素
(3)氧气 含量
如:培养厌氧微生物时需要提供无氧 条件
生长因子
(三)无菌技术
1、取得纯净培养物 关键:
2、无菌技术 四个方面(参看教材20页)
3、消毒与灭菌
(1)消毒:
概念: 使用较为温和 物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害 微生物。包含芽孢和孢子吗？
方法:
煮沸消毒法
巴氏消毒法:如牛奶 消毒
化学药剂消毒:酒精、***气、石碳酸、煤酚皂溶液等
紫外线消毒
(不包含芽孢和孢子)
预防外来杂菌 入侵
（2）灭菌
概念: 使用强烈 理化原因杀死物体内外全部 微生物, 包含芽孢和孢子。
方法: a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
灼烧灭菌
微生物 接种工具 (接种环、接种针)或其她金属用具直接在火焰 充足燃烧层灼烧
注意适用范围
干热灭菌
160－170℃ ; 1－2h
能耐高温 需要保持干燥 物品( 玻璃器皿)
高压蒸汽灭菌
100kPa 121℃
15-30min
通常见于培养基 灭菌
二、试验操作
（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算－称量－溶化－灭菌－倒平板
（二）分离纯化大肠杆菌
接种方法有:
划线分离法和涂布分离法
（三）将接种后 培养基和一个未接种 培养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h后, 观察并统计