文档介绍：酶联免疫技术 与食品安全快速检测
姓名:陈超
学号：201423104001
目录
ELISA概述
ELISA的常用方法
ELISA的应用
一、ELISA概述
酶联免疫吸附试验 (ELISA) ：是在免疫荧光和组织化学基础上发展起来的新技术。
主要是利用抗原与抗体的高特异性反应，通过合适的载体，使酶标抗原或抗体与待测样品反应，形成酶标抗原抗体复合物，在相应的酶底物参与下，复合物上的酶催化底物使之水解成有色物质。一定条件下，呈色物质与待测物的含量直接相关，因此可以根据呈色物质颜色的深浅，对待测样品进行定性定量分析。
基本步骤（以双抗体夹心法为例）
包被：将Ab包被到酶标板上,进行洗涤
封闭：封闭酶标板上的非特异结合位点
加样：将标准品、样品、阴性及空白对照样品加入酶标板，洗涤
加酶标抗体：加入酶标记的二抗，洗涤
显色：加入底物，在酶作用下发生显色反应
检测：检测有色溶液在490nm波长下的OD值
结果分析：绘制标准曲线，分析受检样品浓度
常用的标记酶有：辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化物酶、碱性磷酸酯酶等。
这一类酶通常满足以下条件：
具有较高的催化专一性和活性
与抗原抗体偶联后不影响自身酶活性和抗原抗体的免疫活性
催化反应的信号产物易检测
价廉易得
对人体无害
二、ELISA的常用方法
夹心法
间接法测抗体
竞争法
双抗体夹心法测抗原
双抗原夹心法测抗体
竞争法测抗原
竞争法测抗体
（1）双抗体夹心法
A.      将抗体吸附于固相表面;
B.      加待检抗原，形成抗原-抗体复合物;
C.     加酶标抗体;
D. 加底物。底物的降解量与抗原量成正比。
此法常用于检测抗原