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高中新课标生物必修三知识点总结
专题一 基因工程（基本原理：基因重组）
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品又叫做DNA重组技术。把外源基因转入生物体内，能有效的打破物种界限，定向的改造生物的遗传性状。
DNA重组技术的基本工具
一、“分子手术刀”
1、名称：限制性核酸内切酶，又称限制酶。
2、来源：从原核生物中分离纯化的（真核生物也有）。
3、特点：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且有唯一切点（指每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键）。
4、识别序列大多数限制酶识别序列由6个核苷酸组成（ECORI、
SmaI）；也有少数酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。
5、片段末端：两种形式——黏性末端和平末端。
二、“分子缝合针”
1、名称：DNA连接酶
2、来源：从大肠杆菌中分离得到的，。
从T4噬菌体中分离得到的，为T4DNA连接酶。
3、特点：恢复两核苷酸间的磷酸二酯键。
4、区别：。T4DNA连接酶可连
黏性末端又可连平末端。
三、“分子运输车”
1、载体：质粒（在天然质粒的基础上经过人工改造的）、λ噬菌
体的衍生物、动植物病毒。
2、质粒：细菌细胞内独立于拟核DNA之外，裸露的、结构简单
并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
3、作为载体的条件：
(1)能够在受体细胞内自我复制，或整合到染色体DNA上，随着
染色体DNA进行同步复制，并在宿主细胞内稳定保存。
(2)有一个到多个限制酶切割位点，供外源DN***段插入其中。
(3)具有特殊标记基因，供重组DNA的鉴定和选择（四环素抗性
基因，氨芐青霉素抗性基因）。
DNA连接酶
DNA聚合酶
连接DNA
双链
单链
连接部位
在两个DN***段之间形成磷酸二酯键
将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3’ 端的羟基上，形成磷酸二酯键
四、DNA连接酶与DNA聚合酶
一、目的基因的获取
1、方法：
(1)从自然界中已有的物种中提取出来。
(2)人工合成的基因：基因较小，核苷酸序列已知，通过DNA合
成仪或用化学方法直接人工合成。
(3)从基因文库中获取目的基因：
①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DN***段导入受体菌的群体中储存，各个受菌分别含有这种生物的不同的基因。
②部分基因文库（cDNA文库不含启动子）：只包含了一种生物的
一部分基因。
③操作：根据目的基因有关信息（核苷酸序列，基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性）来获取。
④特点：操作简便，但工作量大，具有一定的盲目性。
(4)利用ＰＣＲ技术（聚合酶链式反应）扩增目的基因：
①原理：ＤＮＡ双链复制的原理。
②前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，并根据这一序
列合成引物。
③过程：a目的基因的DNA受热变性后解链为单链。
b引物与单链相应互补序列结合，在DNA聚合酶（Taq
酶）的作用下延伸。
c重复循环多次。
④优点：可以在短时间内大量扩增目的基因（成指数形式扩增）
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（5）PCR技术与DNA复制比较
PCR技术
DNA复制
相同点
原理
DNA的复制
原料
四种游离的脱氧核苷酸（A，G，C，T）
条件
APT、模板、原料、酶
不同点
解旋方式
高温变性解旋
解旋酶解旋
场所
体外
主要在细胞核内
酶
热稳定性DNA聚合酶
（Taq酶）
细胞内含有的DNA
聚合酶
结果
在短时间内形成大的
DN***段
形成整个DNA分子
二、基因表达载体的构建
1、基因表达载体的构建是实施基因工程第二步，也是基因工程的
核心。
2、使目的基因在受休细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。
3、表达载体组成：复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因
①启动子：是一段有特殊结构的DN***段，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最