文档介绍：HPLC法测定异黄酮含量
大豆异黄酮是大豆生长过程中形成 的一类次生代谢产物。大豆异黄酮在通 常情况下为固体，熔点在100°C以上。 常温下性质稳定，呈黄白色粉末状，无 毒，有轻微苦涩味，在醇类、酯类和酮 类溶剂中有一定的溶解度，不溶于水， 难溶于石油醍、正已烷等。
大豆异黄酮在强酸、高温或酶存在下 可水解去掉葡萄糖基而转变成葡萄糖昔 配基形式(游离大豆异黄酮)。据报道游 离型大豆异黄酮(昔元)约占异黄酮总量 的2%〜3 ,主要以大豆黄素(Daidzein)、 染料木素(Glycitein)和黄豆黄素 (Genistein)形式存在。
抗癌作用
抗氧化作用
具有对骨组织密度的阳性反应，有效防治骨质疏松症；
具有弱的雌激素活性，可用于改善妇女更年期症状；
具有抗酸化能力，能增强心肌收缩力，增加冠状动脉血流
量，对心脏病的危害有良好预防效果；
可降低体内胆固醇和脂肪量，并能影响脂肪代谢，防止高 血压、高血脂，预防心血管疾症发生。
除上述功能、作用外，异黄酮还具有抗真菌性从而抑制真菌活性的 功能。研究表明，大豆异黄酮具有雌激素调节作用，能够改善妇女皮 肤(美容)并对糖尿病及其他并发症、肾肝疾病、牙周炎等有预防和治疗 的功效。
人体资料表明：
可刺激绝经前妇女乳腺增生和子宫内膜增生。
可能会降低男性血管内皮功能
孕妇摄入可致宫内胎儿造血细胞DNA损伤
增加子代生殖系统疾病发生的危险性
动物实验表明：
致癌作用
生殖内分泌毒性
其他毒性：可能具有免疫毒性；可能具有神经毒性；可 能具有细胞毒性；可能具有潜在的遗传毒性。
毒性作用
薄板层析法：操作简单，定量检测精度低多用于定 性分析，适用于生产过程的中间物料及无精度要求 的检测。
紫外分光光度法：分为单波长法和二波长法，两者 步骤相似，操作简便，重现性好，但特异性较差， 主要用于样品中总大豆异黄酮的测定。
高效液相色谱法：目前应用最广泛，为测定保健品 中大豆异黄酮的国家标准法，分离效率高，准确度 精密度高，测定样品范围广，主要用于单个大豆异 黄酮样品的检测，如质量检验及科学研究等。
色相色谱法：进样量少，敏感性、选择性及特异性 较高，但需制备衍生物，操作复杂，耗时长，仪器 昂贵。
毛细管电泳法：快速经济，选择性高，样品前处理 简单分离效率高。
免疫检验法：以酶联免疫法为基础，测定中根据标 记物和干扰物荧光寿命的差异，选择性的测定标记 物的荧光信号。
以下介绍检测保健食品中大豆异黄
酮的测定方法GB 23788-2009-T高效液
相色谱法
固体样品、半固体样品：固体样品粉碎、磨细（过80 目筛）、混匀，半固体样品混匀，〜 （ mg）,用80%甲醇溶液溶解并转移至50mL
容量瓶中，加入80%甲醇溶液至接近刻度。
液体样品：~ 容量瓶中，加入甲醇溶液至接近刻度。
将上述样品溶液用超声波振荡器振荡20min,用80% 甲醇定容，摇匀。取样品溶液置于离心管中，离心机离心 15min （转速大于8000r/min）。取上清液用滤膜过滤，收
集滤液备用。
样品处理
将大豆背、大豆黄昔、染料木昔、大豆素、大豆
黄素和染料木素六种标准贮备溶液按 的比例配成标准混合溶液，