文档介绍:水质检测微生物指标
微生物指标
菌落总数
总大肠菌群
耐热大肠菌群
一、菌落总数
——平皿计数法
:
菌落总数(standard plate-count bacteria)水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后, 所得1mL水样所含细菌总数。
厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求以及非嗜中温细菌, 因为现有条件不能满足其生理需求, 故难以繁殖生长。所以菌落总数并不表示实际中全部细菌总数, 菌落总数并不能区分其中细菌种类, 所以有时被称为杂菌数, 需氧菌数等。
: 营养琼脂
: 培养箱36 ℃+1 ℃等
生活饮用水
1mL水样+15mL45℃左右琼脂 摇匀, 做平行样和空白对照。冷却后, 翻转平板, 36 ℃+1 ℃培养48h后计数。
水源水
先制成1: 10, 1: 100等稀释液, 再按生活饮用水检验步骤进行检验。
注意事项
(1)操作要快而准, 包含材料、加样、倒培养基。
(2)吸液体时液体不能进入吸头。
(3)样品稀释时一定要混匀。
(4)倒培养基前, 瓶口要过火焰。
(5)一定要有空白对照。
(6)培养基温度控制, 培养基薄厚。
作平皿菌落计数时, 可用眼睛直接观察, 必需时用放大镜检验, 以防遗漏。在记下各平皿菌落数后, 应求出同稀释度平均菌落数, 供下一步计算时应用。在求同稀释度平均数时, 若其中一个平皿有较大片状菌落生长时, 则不宜采取, 而应以无片状菌落生长平皿作为该稀释度平均菌落数。若片状菌落不到平皿二分之一, 而其它二分之一中菌落数分布又很均匀, 则可将此平皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度平均菌落数。
①首选30~300之间进行计算, 若只有一个稀释度平均菌落数符合此范围时, 则将该菌落数乘以稀释倍数汇报之(见表1实例1)。
②若有两个稀释度, 其生长菌落数均在30~300之间, 则视二者之比值来决定, 若其比值小于2应汇报二者平均数(见表1实例2), 若大于或等于2则汇报其中稀释度较小菌落数(见表1实例3、4)。
③若全部稀释度平均菌落数均大于300, 则应按稀释度最高平均菌落数乘以稀释倍数汇报之(见表1实例5)。
④若全部稀释度平均菌落数均小于30, 则应按稀释度最低平均菌落数乘以稀释倍数汇报之(见表1实例6)。
⑤若全部稀释度平均菌落数均不在30~300之间, 则应以最靠近30或300平均菌落数乘以稀释倍数汇报之(见表1实例7)。
⑥若所以稀释度平板上均无菌落生长, 则以未检出汇报之。
⑦假如所以平板上都菌落密布, 不要用“多不可计”汇报, 而应在稀释度最大平板上, 任意数其中2个平板1cm2中菌落数, 除2求出每平方厘米内平均菌落数, , 再乘其稀释倍数作汇报。
⑧菌落计数汇报: 菌落数在100以内时按实有数汇报, 大于100时, 采取两位有效数字, 在两位有效数字后面数值, 以四舍五入方法计算, 为了缩短数字后面零数也可用10指数来表示。
表1 稀释度选择及菌落总数汇报方法
实例
不同稀释度的平均菌落数
两个稀释度菌落数之比
菌落总数/(CFU/mL)
报告方式
/(CFU/mL)
10-1
10-2
10-3
1
1365
164
20
——
16400
×104
2
2760
295
46
37750
×104
3
2890
271
60
27100
×104
4
150
30
8
2
1500
×103
5
多不可计
1650
513
——
513000
×105
6
27
11
5
——
270
×102
7
多不可计
305
12
——
30500
×104
二、总大肠菌群
——多管发酵法(另有滤膜法和酶底物法)
总大肠菌群(total coliforms)指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。
: 乳糖蛋白胨培养液、伊红美兰培养基和革兰氏染液。
: 培养箱、平皿和试管等。