文档介绍：色谱柱的故障诊断与维护
液相色谱柱
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Security Notice (if required)
H
LC与GC 色谱柱问题用户调查
色谱柱问题
百分率
Back Pressure, Plugged Frits
24%
Poor Reproducibility
16
Sample Recovery
14
Loss of Resolution
13
Instability
11
Voids
Leaks, Fittings
pH Range
Low Plate Count
Column Overload
Cost
Miscellaneous
15
介绍提纲
I. 常见问题, 现象及排除方案
- 基线漂移/噪音
- 峰型
- 压力变化
- 保留漂移
II. 日常维护/ 良好的实践
- 在线装置
- 样品制备
- 操作的限制
III. 再生/维修已损坏的色谱柱
-物理方法
-化学方法
I. 常见问题
基线噪音
可能的原因:
流动池脏
检测器灯有问题
如果是周期性的,则起源于泵的脉冲
温度对检测器的影响
气泡经过检测器
Time (min.)
基线漂移
梯度洗脱
温度不稳定(示差检测器)
流动相中有污染物
柱中的流动相没有平衡
体系中有污染物流出
可能的原因:
鬼峰
鬼峰——即使不样也会出现的峰
20% - 100% MeOH
没有进样
60
15
30
15
0
3
7
15
17
问题1- 流动相脏
问题2- 样品过量
(也可能是回收率太差)
峰型
双峰
柱塌陷
正常峰
双峰
柱中有死体积
过滤片部分堵塞
只有一个双峰——组分的共洗脱
可能原因:
样品与溶剂不匹配
峰型
所有的峰都展宽
柱效降低——柱死体积
大进样量/ 质量
高捻度流动相
部分峰展宽
前次进样后流出的组分
大分子量样品——蛋白或聚合物
峰展宽
样品与流动相不匹配
峰型
拖尾峰
对称性>
Normal
Tailing
Normal
Tailing
原因:
部分峰拖尾
二次保留效应——残留硅醇基的反应
小峰紧跟在大峰的后面流出
柱头有污染
金属
所有峰拖尾
额外的柱效应
柱损坏
不适当的样品量/溶剂
峰型
Normal
Fronting
前伸峰
不对称性<
可能的原因
柱过载
在大峰前,有小峰流出
样品溶剂不适当
柱死体积
过滤片部分堵塞