微生物实验报告 (3).doc

文档介绍：河流水样中微生物的梯度稀释涂布及培养
实验目的






实验原理


平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释液接种到平板上，经过培养，由每个细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落代表原样品中一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。
实验仪器、试剂与菌种


10~100ul移液器及配套的移液枪头、1ml无菌EP管、250ml三角瓶、试管架即用于稀释的试管、培养皿、涂布器、酒精灯

河流水样1瓶


血细胞计数板、显微镜、1ml无菌EP管、100~1000ul移液器及配套的移液枪头、吸水滤纸

Jurket细胞
4、 实验步骤

．1把事先已经准备好的固体培养基在微波炉中中火加热溶解3min，待其冷却至60~70摄氏度，来超净工作台上无菌操作将培养基等量、均匀倒入已灭菌并干燥的4个培养皿中，轻轻摇动培养皿，使其布满平皿底，每个平皿装量25ml，厚度达3~4mm。
，随后带入超净工作台。
（），充分混合均匀（10-1浓度）。
-1浓度的水样稀释液，注入无菌试管中（），充分混合均匀，进行10-2梯度稀释；-2浓度的水样稀释液，注入无菌试管中（），充分混合均匀，进行10-3梯度稀释；同样步骤重复，分别进行浓度梯度为10-4和10-5稀释。
（10-2、10-3、10-4、10-5）水样稀释液中吸取100ul,尽量均匀地打在培养基上，用无菌涂布器涂布平皿，使涂布均匀。每组一个平板，即10-2、10-3、10-4、10-5梯度各涂布一个平皿。

，对计数板的计数室进行镜检，观察并确定使用的是25x16规格计数板。
，用移液器吸