文档介绍：女贞叶片石蜡切片制作
一、实验目
；
，掌握其各时期构造特点、选材办法；
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二、实验原理
自然状态下活细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种构造之间均缺少反差，在普通光镜下不易清晰区别出；组织离开机体后不久就会死亡和产生组织***，失去原有正常构造。因此研究中多数动、植物材料都必要通过固定、石蜡包埋、切片及染色等环节解决，将组织分离成单个细胞或薄片，才干清晰辨认其形态构造。
切片法，是材料通过一系列特殊解决，运用刃具将组织切成极薄片层，通过固定、脱水、包埋、切片、染色等较繁复环节，最后制成切片办法。依照各种不同材料性质规定进行合理选取解决办法。非切片法操作比较简朴，能保持细胞完整，但是细胞之间正常位置移动无法反映细胞之间正常联系。切片法虽工序繁琐最能保持细胞间正常互有关系，能长期完好地保存细胞原貌，是制作永久性显微切片标本重要办法。
石蜡渗入组织块内部起支持作用并将整个组织块包住，然后再用精密切片机制作切片，获得良好制片效果。石蜡有其独特长处：石蜡能切出极薄蜡片（2～10μm）；切片时能连成蜡带，便于制作持续切片；操作较容易，组织块可以包埋在石蜡中长期保存。但解决中常引起组织某些收缩，切片时受温度、湿度影响较大。
三、实验仪器、材料和试剂
：荧光显微镜、普通显微镜、石蜡包埋工具、恒温箱、包埋箱(熔蜡箱)、旋转切片机、卧式染色缸、载玻片（76×26mm，T=1- mm）、方形盖玻片、电热温台、毛笔、石蜡容器、烧杯、滴管、玻璃板、吸水纸、石蜡
：校园内幼嫩女贞叶片
：无水乙醇、甲醛、级别乙醇、蒸馏水、二甲苯、***仿、冰醋酸、石蜡、甘油、苯、加拿大
树胶、固定液、染色剂、1%番红水溶液、%固绿酒精溶液
四、办法环节

采用标本前，要依照制片规定，选取并配制固定液。研究女贞叶片正常构造选取健全而具备代表性部位取材新鲜便于固定剂迅速渗入内部取材时要详细记录日期、采集地点、标本名称、时期、取材部位、断面和固定液等。
取材后应及时投入固定液，以防女贞叶片组织自溶和***。用锐利刀片将女贞叶片迅速精确切割成所需大小，切勿拉锯式来回切取，轻轻镊取放入固定液中，切取组织大小普通为5mm×5mm，不易超过1cm2。

在一定期间内，组织和细胞离开机体后依然延续着生命活动。为了防止标本发生病理变化，保持原有形状和构造，必要尽早地用某些化学药物迅速地杀死组织和细胞，并将构导致分转化为不溶性物质，防止某些构造溶化和消失。
固定剂作用于细胞内蛋白质、糖、脂肪等各种成分沉淀保存下来，从而保存细胞各种构成成分、形态和构造。固定剂会使柔软组织恰当硬化而不易变形，便于随后解决，变化细胞内部折光率并助染某些难于染色部位，使细胞构造变得清晰并易于保存。
将切取好新鲜女贞叶片，与临用前配制卡诺氏液以1：20比例加入固定期间为12-24小时。本植物材料表面有毛茸或其他不易穿透物质，则可用具有酒精固定液固定。材料投入固定液后具有气泡，将气泡抽出，使材料下沉。卡诺氏液中纯酒精固定细胞质，冰醋酸固定染色质，两者穿透力强并能防止组织由酒精引起高度收缩与硬化。
、染色