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专题5课题1dna的粗提取与鉴定.ppt

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专题5课题1dna的粗提取与鉴定.ppt

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文档介绍

文档介绍:专题5课题1DNA的粗提取与鉴定
一、根底知识
〔一〕提取生物大分子的根本思路:
选用一定的物理或化学方法别离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
〔二〕DNA的粗提取
1、根本思路:
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
一、根底知识
〔二〕DNA的粗提取
2、DNA的特点:
〔1〕溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中的溶解度不同。
DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质那么溶于酒精。
一、根底知识
〔二〕DNA的粗提取
2、DNA的特点:
〔2〕耐受性
蛋白酶能水解蛋白质,但不能水解DNA。
大多数蛋白质不能忍受60-80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性。
洗涤剂可以瓦解细胞膜,去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响。
一、根底知识
〔三〕DNA的鉴定
在沸水浴的条件下,DNA与二苯***反响呈现蓝色。
材料:菜花、鸡血、洋葱等。
二、实验设计
选择原那么:
含有DNA且DNA含量相对较高的生物材料。
〔一〕实验材料的选择
1、 鸡是真核生物,真核生物的DNA主要在染色体上。
2、鸟类的血细胞核大,DNA多。
3、不需要破除细胞壁。
选择鸡血的原因:
问题1:有什么比较简便但是可行的方法可以破碎动物细胞〔如鸡血细胞〕的细胞膜?
〔二〕破碎细胞,获取含DNA的滤液
讨论:为什么参加蒸馏水能使鸡血细胞破裂?
问题2:假设选择植物材料,还可以通过参加一定量的蒸馏水来涨破细胞呢?
〔二〕破碎细胞,获取含DNA的滤液
①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜。
②实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中参加一定的洗涤剂和食盐,进展充分的搅拌和研磨,过滤后搜集研磨液。
洗涤剂的作用:
洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团,可以与细胞膜中的蛋白质结合,使之溶解,进而瓦解细胞膜。
食盐的作用:
食盐中主要含有NaCl,有利于DNA的溶解。
考虑:洗涤剂和食盐的作用是什么?