文档介绍：饲料中维生素E的快速测定方法
摘要：用简便快捷的方法测定饲料中的维生素E，试剂消耗少，稳定性强，回收率也较为理想。
关键词 维生素E 快速 测定
维生素E又称生育酚，能维持***官的正常机能，提高母畜生殖能力，促进机体代谢，提高免疫力和抗应激水平，维生素E还有抗氧化作用，可防止脂肪化合物、维生素A、硒(Se)、两种硫氨基酸和维生素C的氧化作用，提高维生素A的作用。GB／T17812—1999是测定饲料中维生素E含量的传统方法，其原理是用碱液皂化样品，使试样中天然生育酚释放出来，再用***提取未皂化的物质。前处理需经过皂化、提取、浓缩几个步骤，耗时长、过程繁琐、消耗试剂多等局限性。生育酚在碱性环境下极不稳定，在皂化过程中易分解。在提取过程中要用到大量的***，对操作人员的健康伤害大。我们经多次试验，用热的甲醇超声样品，使维生素E溶解到甲醇中，将溶液过膜，上机测定，这种方法操作简便，试剂消耗少，回收率稳定。
1 材料和方法
方法原理
样品中加入甲醇并于一定温度水浴超声萃取，使维生素E溶解于甲醇中，经高效液相测定，用外标法计算其含量。
高效液相色谱仪（安捷伦1100型），配DAD或VWD检测器；超声波振荡器；电子天平：（）。
试剂
甲醇（分析纯）
维生素E（dl-α-生育酚）标准溶液
dl-α-生育酚标准储备液：准确称取dl-α-生育酚纯品油剂（USP），用正己烷溶解并稀释至刻度，混匀，4℃保存。。
dl-α-生育酚标准工作液：
准确吸取dl-α-生育酚标准储备液（），用氮气吹干，用甲醇稀释至刻度，混匀，再按比例稀释。配制工作液浓度每毫升含维生素E50µg。
色谱条件
色谱柱为 Zorbax SB-C18 5μm ×150mm（或相当型号色谱柱）,流动相为95％甲醇(色谱纯)，，柱温为室温，检测波长280nm，进样体积20µL。
试样的提取
称取适量样品与100mL棕色容量瓶中（,复合预混料5－10g），加甲醇80mL，置于50℃水浴中，超声提取15分钟，其中每5min取出用手振摇一次。超声结束后，取出冷却至室温，用甲醇定容至刻度，混匀。取上层清夜过滤或离心，µm膜过滤，供高效液相色谱分析用。
回收率的测定 取适量维生素E标准储备液于100mL棕色容量瓶中,用氮气吹至快干,再称取5g空白样品,使维生素E的含量分别为50µg/g、100µg/g和500µg/g，每个浓度点配制5份样品，求其平均回收率。，以外标法计算含量，以测得量与添加量之比来计算回收率。同时按GB/T17817－1999测定回收率，比较测定结果。
2 结果
2．1标准曲线
维生素E的线性回归方程为：y=-,线性范围是：5µg/mL--300µg/mL,相关系数r＝(如图1