文档介绍：关于中学生物微生物课程培训
第一页，本课件共有41页
一、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
培养基配制 消毒灭菌 土样稀释
平板划线 涂布平板
菌落计数
二、染色技术
芽孢染色、革兰氏染色
三、显微镜直接计数
第二页，本课件共有41页
一、培养基
六要素：碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子、水
根据实验需要选用、设计最适合微生物生长的培养基。
加富性的选择培养基（投其所好），固体培养基
1、选择培养基配方：
琼脂
尿素
葡萄糖
MgSO4`7H2O
NaH2PO4
KH2PO4
水：1000ml
第一专题 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
第三页，本课件共有41页
培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。
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怎样证明此培养基具有选择性呢？
培养基类型
是否
接种
目的
结果
实验组
对照组
以尿素为
唯一氮源
的培养基
胨牛肉膏
蛋白培养基
是
分离
尿素
细菌
判断该
培养基
有无选
择性
只生长尿素细菌
生长多种微生物
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2、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基配方
（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）配方如下：
牛肉膏 3g 蛋白胨 10g ***化钠 5g 琼脂 20g 自来水 1000mL pH ～
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3、步骤：
称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。
溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。
调pH值：用 NaOH或HCl调pH，用pH试纸对照。
加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。
分装：注意不要污染棉塞。
包扎成捆，挂上标签,注明何种培养基。
灭菌备用：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。
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二、消毒灭菌
消毒：使用理化因素方法杀死物体表面绝大多数微生物的方法。
灭菌：采用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物的方法。
干热灭菌法：电热烘箱作为干热灭菌器
高压蒸汽灭菌
：
（1）锅体：一般以2KW电热管作内热源，直接浸
在锅内水中，通电后产生蒸汽。另附有支架，以承受内锅体。
（2）内锅：由铝楹嵌接而成，用于承放待灭物品。底附有活动的栅格板，以防回流冷凝水将物品弄湿。其边上还有一用于插排气管的槽。
（3）锅盖：上有木把手、安全阀、放气阀、压力表
（4）其它：橡皮垫圈、旋钮等
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高压蒸汽灭菌法其步骤如下： ，将包扎好的物品放入其中。 ，进行加热 3. 排除高压锅内的冷空气，可将排气阀打开，待排出大气后关闭排气阀；或关闭排气阀，，待压力回复到0时再关闭排气阀。
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