文档介绍：word
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某某大学
综合设计性实验报告
学院生命科学学院
课程细胞生物学实验
实验项目细胞培养
实验题目小鼠肝细胞的原代培养
专业生物技术
年级、班别生技142
某某徐嘉宽
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学号 1414300030
任课教师鲲
细胞培养
——小鼠细胞的原代培养
摘要目的探讨体外别离和培养小鼠肾、脑、心肌细胞的方法。方法采用脱臼法处死新生小鼠，结合酶消化法和组织块法对新生小鼠肾、脑、心肌细胞进展了体外别离、培养。〔用眼科剪把新生小鼠心肌细胞组织剪成小于1mm³大小的植块，然后用胰蛋白酶消化5~10min，最后将心肌组织块接种于培养瓶中进展体外培养。脑和肾直接进展组织块培养。〕结果比拟成功地进展了原代肾、脑、心肌细胞培养，并进展了形态学观察。结论  采用该方法能够实现对小鼠心肌、肾、脑细胞的体外原代培养，较好观察到心肌、脑、肾细胞的形态。
关键词原代培养小鼠细胞组织块法酶消化法
1前言
初步了解动物细胞原代培养的根本方法、原理和根本操作过程，初步掌握无菌操作方法。学****植块培养法、营养液的配置与酸碱度的调节。细胞培养是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中最根本的实验技术。当前，细胞培养技术广泛应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，已开展成为一种重要的生物技术。了解动物细胞培养的技术的根本操作过程，观察体外培养细胞的生长特征，并对原代培养有一个根本概念。结合酶消化法和组织块法通过无菌操作培养新生小鼠细胞。
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2实验原理
原代细胞培养是指直接从动物体获取的细胞、组织或器官，经体外培养后，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物体取出所需的组织〔或器官〕，用植块培养法或酶解法，在人工培养下，使其不断地生长与繁殖。
细胞培养是一种操作繁琐而又要求十分严谨的实验技术。要是细胞能在体外长期生长，必须满足两个根本要求：一是供应细胞存活所必须的条件，如适量的水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖与其有关的生长因子、氧气、适宜的温度，注意外环境酸碱度与渗透压的调节。二是严格控制无菌条件。
3实验用品
器材
解剖剪、镊1套；眼科剪7把、眼科镊6把；吸管直、弯头各7支，2 ml刻度吸管5支；吸管胶头：小18个、大6个；细胞培养瓶5个；青霉素瓶与瓶塞：6个〔其中一个用于分装胰酶液〕；培养皿(用于解剖取材)：大、小各1套。烧杯：5～10ml 2个、100 ml 1个。
用于无菌操作：解剖镊1把，广口瓶大、小各1个〔装消毒棉球〕，医用棉花、纱布，有盖白瓷盘1个、消毒盒3个、牛皮纸、棉绳。小培养皿(装盖玻片)1个。
试剂
清洗用液：5%稀盐酸、1%稀盐酸、2%NaOH、洗洁精、单蒸水、三蒸水、清洗液〔用浓硫酸和***钾配制、全班共用〕等。
消毒剂〔用前配制〕：甲醛、高锰酸钾、新洁尔灭、75%酒精、碘酒、过氧乙酸等。 培养用液：
细胞培养用液〔每大组100mL，用100mL盐水瓶装〕