文档介绍：实验一培养基制备
实验一培养基制备
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实验一培养基制备
农业微生物实验课指导
（订正版）
草地农业科技学院
草地保护研究所编写
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实验一培养基制备
实验一 培育基的制备
一．实验目的
明确培育基的配置原理。
经过对基础培育基的配置，掌握配置培育基的一般方法和步骤。
二．实验原理
马铃薯葡萄糖琼脂培育基是一种半合成培育基，适合于培育各样种类微生物，特别适合培育真菌。这类培育基是由天然资料马铃薯和葡萄糖构成的，营养丰富并且原料简单获得，是一种使用而价廉的培育基。马铃薯浸出粉有助于各样微生物的生长，葡萄糖供给能源；琼脂是培育基的凝结剂。
牛肉浸膏培育基是一种应用最宽泛和最一般的细菌培育基，有时又称一般培育基，因为这类培育基中含有一般细菌生长所需的最基本营养物质，所以可供作微生物生长生殖之用。基础培育基中含有牛肉膏，蛋白胨和NaCl。此中，牛肉膏作为微生物碳源，能源，磷酸盐和维生素，蛋白胨供给氮源和维生素，而NaCl供给无机盐。在配置牛肉浸膏培育基时还需要加入必定量的琼脂作为凝结剂。
高氏一号培育基是用来培育和察看放线菌形态特色的合成培育基。假如加入适当的抗菌
药物，则可用来分别各样放线菌。此合成培育基的主要特色是含有多种化学成分已知的无机盐，这些无机盐可能互相作用而产生积淀。所以，混淆培育基成分时，一般是按配方的次序挨次溶解各成分，甚至有时还需要将两种或多种成分分别灭菌，使用时再按比率混淆。
三．实验准备
实验资料：牛肉浸膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、NaOH溶液、HCl(酸液)、葡萄糖、马铃薯(土豆)、酒精、可溶性淀粉2g、KNO3g、K2HPO4，MgSO4·7H2Og、NaClg、FeSO4·7H2Og(母液)、琼脂2g、自来水100mL等。
实验器械：高压蒸汽灭菌锅、恒温培育箱、电炉、天平、三角瓶、纱布、线绳、记号笔、超净工作台、pH计、玻璃棒、量筒，烧杯和三角瓶等。
四．实验步骤
(1)PDA培育基：马铃薯葡萄糖琼脂培育基的简称，即 PotatoDextroseAgar。
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实验一培养基制备
1、配方：马铃薯(去皮)200g、蔗糖15-20g、琼脂20-30g、蒸馏水1000mL。PH自然。
2、步骤：
将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为1-3cm的小块，称200g，放入1000mL水中煮沸20-30min，用四层纱布过滤，取其滤液；
(2)定容：加水补足至 1000mL；
(3)加入称量好的蔗糖和琼脂至所有熔解；
(4)趁热分装至试管或三角瓶；
(5)用封口膜封口，扎紧，即可进行灭菌；
(6)灭菌：将上述培育基以，121℃，高压蒸汽灭菌 20min，冷却后将培育基拿出；
(7)一般在培育基温度降至 50-60摄氏度的时候开始在超净工作台上往培育皿中分装；
(8)待培育皿中的培育基凝结后，将培育皿倒置，防备皿盖上的冷凝水污染培育基(此时皿盖在下，培育基中蒸发出的水蒸气是向上走的，仍是凝结于培育基上，就不会有在皿盖上形成水滴后再滴落的状况了，这样可防备污染)。
牛肉膏蛋白胨琼脂培育基
1、配方：牛肉膏 3-5g、蛋白胨10g、***化钠5g、琼脂20-30g、蒸馏水1000mL。PH值
。
2、步骤：
(1)称量：依据用量按比率挨次称取各样成分，牛肉膏常用玻璃棒挑取，放在小烧杯或表面
皿中称量，用热水消融后到入烧杯，蛋白胨易吸湿，称量时要快速。
(2)溶解：在烧杯中加入少于所需的水量，加热，逐个加入各成分，使其溶解，琼脂在溶液
煮沸后加入，消融过程需不停搅拌。加热时应注意火力，勿使培育基烧焦或溢出。溶好后，补
足所需水分。
(3)调pH值：若pH值不适合，可用 1mol/LNaOH或1mol/LHCl把pH值调至所需范围。
(4)过滤：趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利于某些实验结果的察看，如无特别要求时可省
去此步骤。
(5)分装：依如实验要求，可将配制的培育基分装入试管内或三角瓶内；分装高度以试管高
度的1/4左右为宜，分装三角瓶的量则依据需要而定，一般以不超出三角瓶容积的 1/2为宜。
以下步骤同上(5)-(8)
(3)高氏培育基：高氏培育基是用来培育和察看放线菌形态特色的合成培育基。
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实验一培养基制备
可溶性淀粉(20g)、KNO3(1g)、K2HPO4g)、MgSO4·7