文档介绍：紫外分光光度法检测规程
目：
5. 程序：
定义：紫外分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区特定波长处或一定波长范畴内光吸取度，对该物质进行定性和定量分析办法，本法在药物检查中重要用于药物鉴别、检查和含量测定。
. 定量分析普通选取在物质最大吸取波长处测出吸取度，然后用对照品或百分吸取系数求算出被测物质含量，多用于制剂含量测定。
. 对已知物质定性可用吸取峰波长或吸取度比值作为鉴别办法；若化合物自身在紫外光区无吸取，而杂质在紫外光区有相称强度吸取，或在杂质吸取峰处化合物无吸取，则可用本法作杂质检查。
原理：物质对紫外辐射吸取是由于分子中原子外层电子跃迁所产生，
因而，紫外吸取重要决定于分子电子构造，故紫外光谱又称电子光谱。有机化合物分子构造中如具有共轭体系、芳香环或发色基团，均可在近紫外区（200-400nm）或可见光区（400-850nm）产生吸取。普通使用紫外分光光度计工作波长范畴为190—900nm，因而又称紫外—可见分光光度计。紫外吸取光谱为物质对紫外区辐射能量吸取图。朗伯·比耳（lambert—Beer）定律为光吸取定律，它是紫外分光光度法定量分析根据，其数学表达式为：
A=lg
1
=ECL
T
式中：A 为吸取度
T 为透光率
E 为吸取系数
C 为溶液浓度
L 为光路长度
如溶液浓度（C）为1%（g/ml），光路长度（L）为1cm，相应吸取系数为百分吸取系数，以
E表达。若溶液浓度（C）为摩尔浓度（mol/L），光路长度为1cm时，则相应吸取系数为摩尔吸取系数，以ε来表达。
. 仪器：
. 紫外分光光度计重要由光源、单色器、样品室、检测器、记录仪、显示系统和数据解决系统等某些构成。
为了满足紫外—可见光区全波长范畴测定，仪器备有二种光源，即氘灯和
碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。
单色器普通由进光狭缝、出光狭缝、平行光装置、色散元件、聚焦透镜或反
射镜等构成，色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用天然石英或熔融硅石制成，对200—400nm波长光色散能力很强，对600nm以上波长光色散能力较差，棱镜色散所得光谱为非匀排光谱。光栅系将反射或透射光经衍射而达到色散作用，故常称为衍射光栅，光栅光谱是按波长作线性排列，故为匀排光谱，双光束仪器多用光栅为色散元件。
. 检测器有光电管和光电倍增管二种。
紫外分光光度计根据其构造和测量操作方式不同，可分为单光束和双光束分光光度计二类。单光束分光光度计有些仍为手工操作，即固定在某一波长，分别测量比较空白、样品或参比透光率或吸取度，操作比较费时，用于绘制吸取光谱图时很不以便，但合用于单波长含量测定。双光束分光光度计藉扇形镜交替切换光路，使光提成样品（S）和参比（R）两光束，并先后到达检测器，检测器信号经调制分离成两光路相应信号，信号比值直接用记录仪记录，双光束分光光度计操作简朴，测量迅速，自动化限度高，但作含量测定期，为求精确起见，仍宜用固定波长测量方式。
. 紫外分光光度计检定：
. 波长精确度：
波长精确度允差范畴：双光束光栅型紫外—可见分光光度计波长精确度