文档介绍：项目四PCR扩增目的基因大肠杆菌丝氨酸羟***转移酶基因
提 纲
一、PCR技术简史
二、PCR的根本原理
三、PCR的反响条件
四、PCR的类型和应用
五. PCR引物设计及相关软件使用
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
解旋酶
解链酶
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
一、PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反响的创造
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
GGAUCG
5‘
AUCGCG
5‘
引物酶
引物酶
RNA引物
RNA引物
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反响的创造
一、PCR技术简史
ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC
5’
3’
TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG
3’
5’
DNA
解旋解链
合成引物
子链延长
GGAUCG
5‘
AUCGCG
5‘
TAGCGCTATCGCATCGACGCT
3’
ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG
3’
DNA
聚合酶
DNA
聚合酶
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反响的创造
一、PCR技术简史
DNA的复制
核酸体外扩增的设想
聚合酶链反响的创造
一、PCR技术简史
1971年，Khorana提出：经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。
但由于测序和引物合成的困难，Khorana的设想被人们遗忘了……
基因组DNA
获取特定DN***段
扩增特定DN***段