文档介绍：来氟米特对子宫内膜异位症大鼠作用的实验研究摘目的:本研究采用自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,观察来氟米特作用于大鼠子宫内膜异位症,模型的整个影响过程,检测大鼠模型异位灶中激酶转录蛋白,拖赴藕抛5家种埔蜃泶锴榭觯教掷捶滋囟宰庸谀ひ煳恢⒋笫竽P偷淖饔机制。进一步证实免疫调节剂治疗子宫内膜异位症的策略具有可行性,为子宫内膜异位症的临床治疗提供新的治疗策略和靶点以及实验依据。方法:大鼠子宫内膜异位症模型的建立芰浯菩浴⑿猿墒臁⑽丛小⒔】礢笫唬逯由河北省实验动物中心提供细裰ず牛动物模型。该研究符合年赫尔辛基宣言的原则,并得到河北医学院伦理委员会的批准,按等的方法用自体移植法手术建模。术前天给予每天乙烯雌酚痥辔福ü萍に卮咔椋顾写笫笤谕一处于动情期时开始造模。在无菌环境下,以浓度为疞的水合氯醛痥骨蛔⑸渎樽恚钙は荆怪邢叱芄巧蟣处切开约切口,逐层打开腹壁各层,分离出大鼠的右侧子宫,自远端处往近端方向结扎子宫部分血管和需切除的子宫上下端,,去除浆膜外月眨肪组织,放入生理盐水中,快速纵向切开子宫腔,切取的两个片段分别缝于左右两侧腹壁,令其内膜面面向腹壁,剩余的一块送病理确诊为子宫组织。术后连续肌肉注射庆大霉素/只,每天危天,预防感染。术后第湛J家蚁┐品用刻/灌胃,连续臁D康氖谴俳浦材谀どぃ岣叱赡ぢ省P图觳庥肽扇氡曜模型建立的第四个星期,二剖腹探查,观察移植病变增长,按常规建模实验方法判断子宫内膜移植成活标准:移植内膜体积增加,形成一个浅红色或暗红色结节状球泡,被结缔组织覆盖,周围有新生血管的形要捎米蕴逡浦卜ü菇中文摘要,
成,质地柔软,薄壁,内有透明液体积聚,囊泡高度超过撩祝虿理检查证实移植子宫内膜上皮细胞,腺体和间质生长为建模成功。取组织活检标本送病理检查糽。笛榉肿楹透将符合纳入标准的大鼠随机分为四组:空白对照组、来氟米特高、低剂量组及达那唑组。药物组用药量根据《实验动物学》大鼠换算标准“每大鼠给药剂量为成人药物剂量的倍”换算得出。空白对照组无药物治疗,仅每天灌胃给予同体积ヴ燃谆宋厮治疗组来氟米特高剂量组、低剂量组分别按每天/和/灌胃给予含来氟米特的ヴ燃谆宋厮,共埽淮锬沁蜃榘疵刻/灌胃给予含达那唑的ヴ燃谆宋厮,共堋副昙觳夥椒测量异位灶体积二次剖腹时游标卡尺测量异位结节长、宽、高,根据公式寤韈高计算异位灶体积,记作!S靡周后再次开腹测量异位灶体积记作骸M比∫煳辉钭橹直鸱庞赑苤蟹湃胍氮罐中保存,以备后面蛋白检测和检测。蛋白检测取大约管中异位组织加崛∫涸冉崛。/胄∩锨澹尤氲忍寤涎撼逡海℃中煮沸。绻康牡鞍缀啃∮赪检测的敏感度,可将上清液进行冷冻干燥浓缩=芯郾0纺旱缬荆靠咨涎攘孔艿白。利用水浴式电印迹法将蛋白转移至膜上。室温振荡封闭膜后,加入獗找合∈的第一抗体,室温缓慢摇荡,用猅洗膜魏螅偌尤:獗找合∈的昙堑牡诙固澹温振摇,浞窒茨ず螅そ隓显色液中,室温充分显色后,立即用蒸馏水洗膜,然后将膜转入泄鄄臁⒄障唷C芏壬仪扫描胶片,以狝蛋白灰度值为内参照,行半定量分析。细胞信号传导抑制因子一觳ㄌ崛∽躮螅舛ê怂崤ǘ燃按慷.,取等量进行逆转录一聚合酶链反应,上下游引物为:中文摘要
’和敞’,扩增片段为从μ跫涸け湫℃鲅罚粤姿岣视腿┩亚饷为内参照校正,行半定量分析。臣蒲Х治龇椒计量数据采用均数±标准差±表示,两样本的比较采用验,多样本资料采用完全随机设计方差分析,组间均值两两比较用法,.。结果:笛槎镆话闱榭觯共建模成功只大鼠,病理检查证实移植物中均有子宫内膜上皮细胞、腺体和间质的生长见,建模成功的异位灶大体标本见。在喂药期间,对照组死亡唬酪蛭G锌诟腥荆恢瘟谱樗亡唬酪蛭3W韪腥尽F溆辔葱纬傻湫鸵煳辉钐蕴3赡ぢ捶滋囟源笫笞庸谀ひ煳辉畹挠跋欤治疗前各组异位内膜体积差异均无显著性.,,治疗疗后各药物组异位内膜体积均有不同程度得缩小,内膜囊泡液减少或者消失。空白对照组体积明显增大、血管丰富,来氟米特高剂量组和低剂量组以及达那唑组大鼠子宫内膜异位灶体积则缩小,四组大鼠子宫内膜异位灶体积变化用药前后比较分析,各组用药前后体积差值之间有差别,W榧浔冉侠捶滋馗呒亮孔樘寤飨运跣。功地抑制了异位灶生长,高剂量组与达那唑组比较无统计学差异,说明高剂量组和达那唑组的疗效相当,但是来氟米特对性激素轴无影响,不影响受孕,因此优于达那唑组。对照组和治疗组在分子量~鱿盅粜院谏醮各组均有所下降。经单因素方差分析,┪镒橛肟瞻锥哉兆楸冉系鞍妆泶锵灾。鞍椎谋泶蛋白。空白对照组蛋白表达明显升高..其余中文摘要,℃,
降,。来氟米特高剂量组对蛋白表达的抑制作用最显著,来氟米特低剂量组和达那唑组比较差异无统计学意义,两者对蛋白抑制作用一样。空白对照组表达明显升高..,其余各组表达均下降。来氟