文档介绍：2021年微生物学实验报告
2021年微生物学实验报告
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2021年微生物学实验报告
微生物学试验汇报
试验一 一般光学显微镜使用及细菌染色与形态观察
第一部分: 显微镜使用
一、 目要求
1．熟悉一般光学显微镜结构、 油镜使用原理和显微镜维护方法。
2．学会正确使用油镜观察细菌基础形态和特殊结构。
3．了解多种显微镜关键特征。
二、 试验原理
（一）光学显微镜结构
微生物试验室中最常见是一般光学显微镜, 它结构可分为机械部分和光学部分。
1、 机械部分
一般复式光学显微镜机械部分通常包含以下多个部分: 目镜、 镜筒、 基座回转器、 物镜、 载物台、 光圈、 聚光器、 光源、 镜臂、 细调整器、 粗调整器等。
2、 光学部分: 目镜、 物镜、 聚光器、 光圈、 光源。
（二）放大倍数
标本首先经物镜放大, 在目镜焦距平面上形成一个实像, 再经过目镜放大成最终虚像。总放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数乘积。
物镜放大倍数愈大, 其工作距离（物镜镜头到标本片之间距离）愈短, 这时光圈就要打开得愈大。
显微镜放大倍数
放大倍数
总放大倍数
低倍镜
物镜
10×
目镜
10×
100×
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高倍镜
油镜
45×
100×
10×
10×
450×
1000×
（三）分辨距离与分辨力
显微镜性能受物镜分辨距离或分辨力所限制。分辨距离即透镜所能分辨两个物点之间最小距离, 分辨距离愈小, 透镜分辨力愈高, 物像也就愈清楚。所以常以分辨距离来衡量显微镜分辨力。
R=
式中: R-----分辨距离;
λ------作用光波长;
------数值口径。
部分介质折射率
介 质
折射率
空气
水
玻璃
香柏油
1
13
55
三、 试验内容
材料: 显微镜, 香柏油, 擦镜纸。
方法:
细菌很小, 须使用油镜方可观察到。油镜是显微镜上最关键部件之一, 观察时与玻片非常靠近, 稍不小心即可压碎玻片, 更严重是损坏镜头, 故必需极其仔细地学****油镜使用方法:
1、 为使低倍镜取得最适之光源, 可将低倍镜头调整到离载物台约1cm高度, 将聚光器提升, 光圈完全打开, 然后调整电压旋钮至视野最适宜。
滴一滴香柏油, 固定于载物台上, 用推进器调整到载物台正中。在双目侧视下, 下旋粗调整器, 使油镜头浸入油中几乎与标本片相接触。然后眼睛从目镜观察（如光线不足, 可合适增大电源电压）, 渐渐上旋粗调整器至看到模糊物像以后, 再用细调整器调整以使物像清楚。如镜头已离开油面还未看到物像, 则再重新操作。
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更换标本时应先提升油镜头, 再更换玻片, 切勿随意移动显微镜位置。
油镜观察完成后, 按“显微镜保护”中（6）项处理。
最终将油镜各部分还原, 聚光器下降, 反光镜垂直于镜座, 镜头转成八字形, 以免与聚光器发生碰撞。
四、 思索题
1、 使用显微镜时为何调整下列结构？反光镜, 光圈, 聚光器, 粗调整器, 细调整器, 镜头回转器。
答: 聚光器位置之升降可影响视野明亮度, 上升则视野明亮, 下降则光线减弱。光圈放大或缩小也可控制视野明亮程度。粗调整器和细调整器均是调整焦距装置。镜头回转器为装置物镜和转换物镜之用。
2、 使用不一样放大倍数物镜时, 工作距离与光圈关系。怎样利用这一原理用好显微镜？
答: 物镜放大倍数愈大, 其工作距离（物镜镜头到标本片之间距离）愈短。标本首先经物镜放大, 在目镜焦距平面上形成一个实像, 再经过目镜放大成最终虚像。总放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数乘积。
3、 为何要选择与玻璃折射率相同香柏油作为油镜介质？油镜原理是什么？
答: 香柏油只在使用油镜头时（100倍物镜）使用, 因为当镜与装片之间介质为空气时, 因为空气（n= ）折射率不一样, 光线会发生折射, 不仅使进入物镜光线降低, 降低了视野照明度, 而且会降低镜口角。当以香柏油（n=）为介质时, 因为它折射率与玻璃相近, 光线经过载玻片后可直接经过香柏油进入物镜而不发生折射, 不仅增加了视野照明度, 更关键是经过增加数值孔径达成提升分辨率目。。, 它能分辨两点之间距离为 ; , 。选择香柏