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固相膜免疫测定.ppt

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文档介绍

文档介绍:第十二
第一节 概述
一、免疫测定分类
二、免疫测定原理
三、固相免疫测定
四、固相膜的特点
五、常用的固相膜
六、固相膜的技术要求
第十二章 固相膜免疫测定
第二节 免疫金标记技术
一、胶体金的制备
第三节 膜载体免疫测定的种类与原理
一、膜固相免疫测定的特点
二、固相微孔膜测定种类
三、免疫渗滤试验和免疫层析试验
四、酶联免疫斑点试验
五、免疫印迹
六、放射免疫沉淀试验
思考题
小结
随着免疫学技术和相关生物化学技术的开展,检测方法上派生出了多种类型的固相膜免疫快速检测试验。该类试验的最大特点是不需要大型设备,对检测人员稍加培训即能掌握操作要求和判定标准。
第一节 概述
标记免疫测定
放射免疫测定   1960’
酶免疫测定    1970’
荧光免疫测定 1980’-1990’
化学发光免疫测定 1990’-
膜固相免疫测定 1990’-
一、免疫测定分类
免疫浊度测定
Ag + Ab AgAb + Ab
标记免疫测定
Ag + Ab* Ag Ab* + Ab*
〔B〕 〔F〕
二、免疫测定原理
利用抗原抗体反响检测标本中微量物质
 抗原+抗体 抗原抗体复合物
Ag +Ab  Ag * Ab
三、固相免疫测定
B与F别离
Ab* Ab*
Ag + Ag + Ab*
Ab Ab
四、固相膜的特点
多孔性 毛细管作用
非共价键高度吸附抗体或抗原 高度敏感性
易于漂洗 操作简便
五、常用的固相膜
玻璃纤维素(fiberglass)膜
尼龙(nylon)膜
聚偏氟乙稀( polyvinylidene fluoride ,PVDF)膜
硝酸纤维素〔nitrocellulose,NC〕膜
六、固相膜的技术要求
孔径:~ μm
流速:以ml/cm2/min表示
蛋白质结合力:吸附力很强,以μg/cm2表示
均一性

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