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小鼠双尾c基因克隆、1蛋白多克隆抗体制备及初步应用.pdf

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小鼠双尾c基因克隆、1蛋白多克隆抗体制备及初步应用.pdf

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小鼠双尾c基因克隆、1蛋白多克隆抗体制备及初步应用.pdf

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⋯~趣学位论文作者签名:煎垒友期:丛壁矗篺篁日期:◇。原创性声明经注明引川的内容外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得凼墓直太堂及本人声明:所呈交的学位论文是本人在导师的指导下进行的研究骷叭〉玫难芯砍晒3疚囊其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同鹤鞯耐径员狙芯克龅娜魏喂毕拙言诼畚闹作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:日期:本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:、部门送交学位论文的复印件和磁盘,允许编入有关数据库进行检索,也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文。为保护学院和导师的知识产权,作者在学期间取得的研究成果属于内蒙古大学。作者今后使用涉及在学期间主要研究内容或研究成果,须征得内蒙古大学就读期间导师的同意;若用于发表论文,版权单位必须署名为内蒙古大学方可投稿或公开发表。指导教师签名:
⑾郑其功能丧失导致果蝇胚胎滤泡细胞的错误迁移、头部的缺失和双尾结构的形成。多个物种都含有该基因的同源基因,其中小鼠同源基因娜笔У贾滦∈蟛生与人类多囊肾疾病高度相似的症状,但其具体功能还未知。克隆小鼠:是研究其基因产物功能的基础,本研究以小鼠肾脏组织总D0逄逋夥醋B嘉猠ü侄纬彩絇及酶切连接的方法获得了全长约⑽尥槐涞男∈驜序列,并成功构建其真核表达载体根据生物信息学分析结果,,┰鱿嘤Φ男∈驜编码片段,并成功构建其原核表达载体;诱导表达,回收并纯化融合蛋白甆。和甆.,制备两种兔抗鞍锥嗫寺】固濉证实这两种抗体具有高度特异性,并用细胞免疫荧光方法及免疫组织化学方法初步分析了该蛋白主要定位于鼠肾细胞的细胞质内,为进一步研究虿锏纳锕δ艿於肆己没关键词:小鼠双尾颍珺,克隆,原核表达,多克隆抗体。戴宝贞小鼠双尾蚩寺蛋白多克降抗体制备及初步心用
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刖吾双尾一紫仍诠斜环⑾郑涔δ苌ナ种中发现了果蝇瓹耐椿颉】。这些同源基因在进化上高度保守:其结合结构域,含有该结构域的蛋白通过与岷希斡雖募艚雍头耄⑽諶不同物种同源基因的功能已部分阐明。在较低等的生物如线虫和果蝇中,.肱咛シ⒂芮邢喙兀诮细叩鹊纳锶缧∈螅没蛟虿斡肓瞬糠制鞴儆绕涫的蛋白能够促进生殖细胞控细胞从有丝分裂转向减数分裂薄俊W⋯ü隦的结合涉及早期胚胎发育的胚层特化6∈驜和人类蚬δ苣壳盎怪V跎佟蛲槐涞男∈蟊硐殖鲇肴死喽嗄摇I黾膊「叨认嗨频闹⒆矗蚨没蛲槐涞男∈成为研究人类多囊肾疾病发病机制的理想模型。例女珹O嗨疲ú嗨猩龅ピ>⑸抑祝话愠錾纯合子小鼠的蛟号外显子上的一个碱基发生突变贾号缺失了拇蟛糠旨癒、蚐结构域【】。最近鹊难芯糠⑾郑∈驜蛋白在体外能够与岷希銴结构域对于慕岷鲜潜匦璧模虼薆赑蛋白在体外无法与岷俊4送猓没虻耐槐浠褂跋炱渌鞴偃绺卧嗪鸵认俚恼7⒂蜕导致果蝇胚胎头部的缺失和双尾结构的形成K婧笙嗉淘谙叱妗⒆⋯浮⑿∈蠛腿死嗟任蛋白产物均含有巳舾筛鯧峁褂虲端的一个结构域【浚鞘堑鞍追⒒由锕δ艿墓丶峁褂颉俊峁褂蚴荝的稳定性【。.=榈嫉鞍字之间以及蛋白质与核酸之间的相互作用】。肾脏的常形成【】。秀丽隐杆线虫减数分裂并引发精子发生过程【;可与形成复合体激活的表达,从而调!⒂械淖饔茫罱麮等通过制备果蝇—鞍椎目固宀⒗妹庖叱恋淼姆椒ù庸阎蟹掷肓薆瓹特异结合的渲邪˙陨韒鸵恍┎斡肼逊⑸跋赴羌艿骺氐幕纯合子小鼠模型的表型与人类常染色体显性多囊肾疾病死亡【外显子缺失并在磐庀宰又刑嶙詛『产生终止密码子,其蛋白质产物呲挥霭被幔産蛾宝贞小鼠双尾钥寺蛋多克降抗体制各及初步心用.▲上.
可能是通过、峁褂蛴肫渌鞍谆騌形成复合体并介导基因表达调控从而在肾的实验基础材料;根据生物信息学分析结果,选择抗原性较好的蛋白区段作为免疫原,构建其原核表达载体,诱导融合蛋白的可溶性表达,制备两种兔抗小鼠鞍椎亩嗫寺】固澹尝试通过细胞免疫荧光染色及免疫组织化学方法检测该蛋白在鼠肾