文档介绍：小鼠脱氢表雄*** (DHEA) 酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：
96T
1nmol/L -40 nmol/L
使用目的：
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中脱氢表雄*** (DHEA) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠脱氢表雄*** (DHEA) 水平。用纯化的小鼠脱
氢表雄*** (DHEA) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入脱氢表雄
***(DHEA) ，再与 HRP标记的脱氢表雄*** (DHEA) 抗体结合，形成抗体 -抗原 -酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下
转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脱氢表雄***
(DHEA) 呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度（
OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠脱氢表雄***
(DHEA) 浓度。
试剂盒组成
1
30倍浓缩洗涤液
20ml×1瓶
7
终止液
6ml ×1瓶
2
酶标试剂
6ml ×1瓶
8
标准品（ 80 nmol/L ）
×1瓶
3
酶标包被板
12孔 ×8条
9
标准品稀释液
×1瓶
4
样品稀释液
6ml ×1瓶
10
说明书
1份
5
显色剂 A液
6ml ×1瓶
11
封板膜
2张
6
显色剂 B液
6ml ×1/瓶
12
密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于 -20℃ 保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的（ HRP）活性。
操作步骤
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
40 nmol/L
5号标准品
150
μl的原倍标准品加入
150 μl标准品稀释液
20 nmol/L
4号标准品
150
μl的 5号标准品加入
150 μl标准品稀释液
10 nmol/L
3号标准品
150
μl的 4号标准品加入
150 μl标准品稀释液
5 nmol/L
2号标准品
150
μl的 3号标准品加入
150 μl标准品稀释液
nmol/L
1号标准品
150
μl的 2号标准品加入
150 μl标准品稀释液
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.
温育：用封板膜封板后置
37℃ 温育 30分钟。
4.
配液：将 30倍浓缩洗涤液用蒸馏水
30倍稀释后备用
5.