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大達工此火孝
硕士学位论文
中文题目: 高抑菌活性乳酸菌素的研究
英文题目:
学科、专业: 食品科学
隶属学院: 生物与食品工程学院
研究生: 李霞
指导教师: 牟光庆教授
年月
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论文题目: 高抑菌活性乳酸菌素的研究
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巧年月彡曰
摘要
摘要
本实验对于乳酸菌素产生菌的分离、筛选、鉴定和乳酸菌素的提取纯化、理化性质、
抑菌谱的测定进行了研究, 并与其他食品防腐剂进行了对比。
实验从多种样品中分离出株乳酸菌, 采用牛津杯定量扩散法筛选出一株抑菌活
性最高的乳酸菌, 经鉴定为植物乳杆菌。乳酸菌发酵液的抑菌圈直径为,
经硫酸铵盐析、透析脱盐、离子柱层析和凝胶柱层析后的抑菌
圈直径分别为、、和。用高效液相色谱进行纯度
鉴定, 得到一个峰, 表明样品得到很好纯化。
对纯化后的乳酸菌素进行水合茚三***和双缩脲反应, 结果表明该乳酸菌素为多肽或
蛋白质类物质。对该乳酸菌素的热稳定性、稳定性、酶敏感性和抑菌谱进行测定,
温度小于° 乳酸菌素抑菌活性很强, 大于° 其抑菌活性随温度升高而降低, 它的
抑菌活性随值升高而降低, 值为时只有少量活性, 它与胃蛋白酶和胰蛋白酶
作用后丧失抑菌活性, 它对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、八
叠球菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌和肉毒梭菌都有抑制作用。
将该乳酸菌素与其他食品防腐剂、那他霉素和苯甲酸钠进行对比, 该乳酸菌
素比、那他霉素和苯甲酸钠有更好的抑菌作用。它不仅对革兰氏阳性菌有明显的
抑制作用, 对革兰氏阴性菌也有很强的抑制作用, 是一种具有潜在应用价值的新型生物
防腐剂。
关键词: 乳酸菌素, 菌种鉴定, 提取纯化, 理化性质, 抑菌谱
A b s t r a c t
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I n t h i s s t u d y , t h e i s o l a t i o n , ,
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目录
目录
第一章文献综述
研究的目的与意义
天然防腐剂介绍
天然防腐剂的分类
来源于植物的天然防腐剂
来源于动物的天然防腐剂
微生物类防腐剂
研究的目的与意义
在乳制品中的应用
在肉制品中的应用
在啤酒中的应用
在果汁饮料中的应用
在罐装食品中的应用
在植物蛋白食品中的应用
在食品包装材料中的应用
在医疗保健中的应用
国内外研究动态
乳酸菌素的发现及发展史
乳酸菌素在我国的发展
乳酸菌素的研究动态
实验研究内容
实验研究内容
重点实验方法介绍
乳酸菌的分离方法
乳酸菌素抑菌活性的测定方法
乳酸菌的鉴定方法
高效液相色谱测定纯度方法
目录
第二章材料与方法
实验材料
主要仪器
试验试剂
试验样品
菌种
主要培养基
培养基(
分离培养基(
检测培养基(
肉汤培养基(
菌种保藏培养基
糖发酵培养基(
蛋白膝水培养基(
葡萄糖蛋白胨水培养基(
明胶培养基(
柠檬酸钠培养基(
***盐培养基
主要试剂的配制
生理盐水
浓度为的溴甲酚绿乙醇溶液
浓度为的溶液
的乳酸缓冲溶液
浓度为的溶液
浓度为的溶液
的盐酸溶液
浓度为的蓝葡聚糖铬酸钾溶液
吲哚反应试剂
酸性***试剂
***盐还原试验中的甲液
***盐还原试验中的乙液
目录
浓度为茚三***乙醇溶液
浓度为的氢氧化钠溶液
浓度为的溶液
实验方法
乳酸菌的分离
各种样品的预处理
乳酸菌的分离与纯化
产细菌素乳酸菌的筛选
乳酸菌素的抑菌测定
发酵液中乳酸的定量测定
发酵液中乳酸菌素活性的比较
菌种鉴定
观察菌落特征
革兰氏染色并观察个体形态
芽孢染色
糖发酵试验
吲噪试验
***红试验
试验
硫化氣产生试验
明胶液化试验
三糖铁培养基反应试验⋯
柠檬酸盐利用试验
石蕊牛乳试验
***盐还原