文档介绍：第十章蛋白质的研究方法与原理
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第一节概述
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蛋白质的分离纯化包括以下过程：
，并用适当的缓冲液将蛋白质抽提出来；
; （盐析法或有机溶剂法）
；
；
。
直接从生物组织中提纯蛋白——
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制备过程中注意事项：
要求自始至终保持在天然状态
避免一切过激因素--如过酸或过碱，高温，
重金属等的影响。
2. 通常都在低温条件下操作。
3. 尽可能使样品中蛋白质的浓度维持在较高
水平。
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第二节蛋白质的分离与纯化技术
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一、蛋白质沉淀与结晶
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（一）盐析法
概念：将中性盐加入蛋白质溶液，破坏水化膜和电荷而使蛋白质沉淀，叫盐析。各种蛋白质盐析所需的盐浓度及PH不同，加入不同浓度的中性盐可使各种蛋白质依次分别沉淀出来。
优点：操作简便
对易变性的蛋白质有一定的保护作用，
适用范围十分广泛。
缺点：分辨能力差，纯化倍数低
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（1）盐的种类
对同一种Pr而言，价数愈高的盐离子，盐析能力
也愈强:
PO3-4＞SO42-＞C2O42-＞（CHOHCOO-）2＞
AC－＞CL－＞NO3-＞Br -＞I-＞CNS-
K+＞Rb+＞Na+＞Cs+＞Li+＞NH4+
常用的中性盐有如硫酸盐、磷酸盐等。
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硫酸铵（常用盐析剂）

优点：盐析能力较强
具有较高的溶解度
较低的溶解度温度系数
价格低廉
不产生副作用。

缺点：缓冲能力较差
PH难控制
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（2）PH和温度
S。代表蛋白质在无机盐溶液中的溶解度

除取决于Pr的种类，还受PH及温度影响:
PH=PI时，S。的数值极小
S。随温度增加而减低。
盐析过程中，若增高温度，有助于Pr的析出。
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