文档介绍：第 36 卷 第 4 期 农 业 工 程 学 报
294 2020 年 2月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Feb. 2020
利用侧流核酸试纸条快速检测非洲猪瘟病毒
王之莹，于文杰，谢瑞彬，乔 璐，陈爱亮※
（中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所，北京 100081）
摘 要：为满足基层普通实验室或养殖场等资源有限的实验室对非洲猪瘟病毒（African swine fever virus, ASFV）的检测
需求，该研究开发了一种简单、快速、低成本的检测技术，可以用肉眼观察检测结果。研究将传统聚合酶链式反应
（polymerase chain reaction, PCR）与胶体金试纸条技术结合，开发一种低成本的侧流核酸测定试纸条（lateral flow nucleic
acid assay, LFNAA）。该体系设计了独特的尾引物，避免了传统核酸试纸条的半抗原标记及抗体的使用。经过 PCR 扩增后
产生一端带着单链寡核苷酸尾巴的双链 DNA 产物，能够与胶体金标记的寡核苷酸捕获探针结合，从而在试纸条上形成可
以用肉眼观察的目标产物。该 LFNAA 试纸条能够在猪瘟病毒（Classical swine fever virus, CFSV）、猪瘟病毒猪繁殖与呼
吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）、猪圆环病毒 1 型（Porcine circovirus 1, PCV1）、
猪圆环病毒 2 型（Porcine circovirus 2, PCV2）、猪伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）、猪细小病毒（Porcine parvovirus
virus, PPV）中特异的鉴定出 ASFV 的存在，其灵敏度与琼脂糖凝胶电泳的分析结果一致，均能达到 103 copies/μL。因此，
仅需要一台普通 PCR 仪，即可对 ASFV 进行快速灵敏的鉴定（<2 h），其低成本、操作简便的特点非常适合资源有限的