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交叉配血(凝聚胺法).docx

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文档介绍

文档介绍:交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
原理
凝聚***( polymatching )法首先利 用低离子介质降低溶液的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,促进血清(浆)中的抗体与红细胞相应抗原结合,再加入带亚电荷的高价阳离子多聚物-凝聚***溶液,中和红细胞表面的负电荷,缩 短细胞间距,形 成可逆的非特异性聚集,并 使 IgG 型抗体直接凝集红细胞。加 入中和液后,仅由凝聚***引起的非特异性聚集,会因电荷中和而分散,而由抗体介导的特异性凝集则不会分散。
标本采集:
标本种类: 抽取静脉血 3-4ml 待凝固后分离血清,将细胞配成 5%盐水悬液将供血者血样以同样方法分离血清(浆)和红细胞悬液。
标本要求:抗凝和干燥管均可,如用抗凝血主张用 EDTAK2( mg/dz )抗凝标本应无溶血,切标签齐全。
标本储存:急诊标本 30 分钟内完成操作,标本应至 4℃冰箱保存 7 天。
标本运输:室温运输。
标本拒收标准:细菌污染。溶血标本,标签不齐全不能作测定。
试剂:
试剂名称:凝聚***试剂 (polymatching)
试剂生产厂家:(台资)珠海贝索生物技术有限公司。
试剂组成:
试剂 1. 低离子介质 (LowLonicMedium ,LIM). 试剂打开使用后,可置室
温贮存,未开封者 2-25 度贮存,有效期为 2 年。
试剂 2. 凝聚***溶液 (PolybreneSolution). 贮存及有效期同上。
试剂 3. 重悬液 (ResuspendingSolution). 贮存及有效期同上。
试剂 %生理盐水。
仪器:
血型血清离心机:80-2 型离心机江苏金坛市大地自动仪器厂
离心机:江苏金坛市大地自动仪器厂
电热恒温水箱:江苏金坛市医疗器械厂
显微镜:XSZ-H3( 中国)
操作步骤及结果判断:
供受者红细胞用生理盐水配成 3-5 %的细胞悬液。加样量均为:血清 2 滴,红细胞悬液 1 滴。主 管:受血者血清+供者红细胞悬液; 次管:受者红细胞悬液+供者血清;( 阴阳对照管另设)。
各管分别加低离子介质 混匀置室 温 1 分钟。加 凝聚***溶液 2 滴,
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
混匀,置室温 15 秒。
(3400rpm) ,离 心 10 秒,弃 上清液,管 底保留约


液体。轻
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
交叉配血(凝聚***法)
试管,目测红细胞有无凝集。如无凝集,则重做前面试验。
加入 2 滴重悬液,轻轻混合,肉眼或显微镜下观察结果。
凝块在 1 分钟内分散,试验结果为阴性,供受者血液配合; 反之,如依照为不同强度的凝块,试验结