文档介绍：7跤崾螅髅蠹尤“蘑蠡撼逡海人参皂苷蚏促进神经递质释放的作用机理研究摘要目的:研究人参皂苷虸№俳枢神经递质释放作用的机制。人参皂苷对中枢神经系统的影响已经得到广泛研究,结果表明其对多种神经递质的释放均起着调节作用。突触蛋白姿峄诘葜适头殴讨发挥关键作用。我们研究目的是了解和鹘谏窬质释放是否与鸬膕磷酸化水平有关。方法:本实验在细胞水平上采用法测量和灾惺嗌窬葜使劝彼崾头抛饔玫谋壤赴庖呷色法和细胞水平以及动物突触体水平上采用法检测蚏对突触蛋白姿峄降挠响。首先进行神经递质释放测定,即均匀接种细胞于预先用多聚赖氨酸包被的直径为培养皿中。细胞生长小时后进行试验。,浞智逑磁嘌笾信嘌加撼逡悍跤。抑制剂组于孵育前尤后全部吸进至埽保存。此后于,,敝馗瓷鲜霾僮鳌F渲杏崾奔尤肱ǘ任。腞和。高压液相玎法测谷氨酸含量。接着进行细胞免疫荧光染色分析姿峄化,即即均匀接种细胞于预先用多聚赖氨酸包被的盖玻片上,盖玻片置于六孔板中。细胞生长小时后进行实验。中文摘要
浞智逑磁嘌逯信嘌用驪缓冲液在下孵育种谱橹蠬于孵育前尤搿K婧螅入浓度为’腞和饔胠。逑巍<尤%多聚甲醛室温固定清洗危温封闭琌..清洗巍<尤一抗磷酸化,室温孵育。含%逑次。加二抗室温孵育。封片,在荧光显微镜下观察,用分析软件分析。然后进行细胞分析姿峄浠戳呀细胞后提取总蛋白,ú舛ㄑ纷艿鞍缀俊C孔楦魅总蛋白样品上样,,电泳完毕转移至膜上,室温封闭,加入一抗于育过夜,漂洗,加二抗室温孵育,漂洗,显色。用化学发光仪器成像,软件分析处理。最后进行突触体水平上玸分析姿峄浠刺崛⊥淮ヌ宓鞍祝溆喙檀笾峦于细胞水平上玸分析姿峄浠程。结果:葜适头挪舛ū砻鳎胛创碜橄啾龋“·的蚏组可以引起谷氨酸释放增多,表明两者都有促进递质释放的作用。而预先用匾煨砸制剂砗螅劝彼崾头帕康陀谖创碜椋砻髯瓒揪逗螅葜适头呕峒跎佟5痹俅渭尤隦后,谷氨酸释放仍然会增加,说明梢圆灰览涤赑途径而引起递质释放增加;但是再次加入螅劝彼崾头湃匀坏陀未处理组,表明俳劝彼崾头攀墙橛赑的活性变中文摘要水平上玸
化而完成。赴庖呷旧ń峁砻鳎胛创矶哉兆橄比,“·猂组荧光强度明显增加,表明梢蕴高姿峄剑欢鴏·橛ü馇慷仍没有明显变化,提示詓磷酸化水平无影响。与.№橄啾龋琀组荧光强度显著减弱,可见用种萍罤预处理,阻断幕钚院螅琑不能提高姿峄剑砻鱎是介于幕化来提高磷酸化水平;和一肚·组相比,橛ü馇慷仍蛎挥忻飨员浠细胞水平和突结论:以上结果提示俳葜适头诺幕朴肫渖系姿峄接泄兀移渥饔没坪芸赡苁墙橛赑途径而完成。而俳葜适头旁蚩赡苡雜磷酸化水平无关。这为从分子水平上阐明人参皂苷的药理活性提供理论基础。关键词:人参皂苷;神经递质;突触蛋白;籔触体水平结果与细胞免疫染色结果相一致。细胞中文摘要
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人参皂苷蚏促进神经递质释放的作用机理研究醇类,如琑等⋯。迄今为止已发现人参鑫R恢终涔蟮拇持胁菀┎模坏中国和其他东亚国家医药学领域占有重要地位,而且自从上个世纪八十年代已经在西方国家得到广泛关注和研究【俊】现已证明,人参皂苷是人参的一类生物活性成分【俊H瞬卧碥瞻雌浠灾屎徒峁共煌煞治A酱罄啵原人参二醇啵鏡,龋辉瞬稳有多种的人参皂苷,蚏是其中最具有代表性的既往研究证实人参皂苷具有多种药理效应,如对中枢神经系统,心血管系统,内分泌系统以及免疫系统疾患都有改善作用】【縡。其中,人参皂苷对中枢神经系统的影响已经得到广泛研究,结果表明其对多种神经递质的释放均起着调节作用。例如,人参皂苷可以增加啮齿类动物大脑皮层中多巴***和去甲肾上腺素的浓度【縪蚏可以增加皮层及海马组织中乙酰胆碱暮坎⒋俳涫头牛匝记忆和哂忻飨砸谆驮銮孔饔谩】【俊。谷氨酸在脑神经发育和学****记忆过程中扮演重要角色【】,蚏可对兴奋性谷氨酸过量释放导致的神经细胞损伤具有营养和保护作用【А神经元之间信息传递主要是由神经末梢突触囊泡研究论文成分【俊】。刖.“罱
的作用㈣【】【】【释放的递质所介导。神经突触间递质的释放是神经系统完成其生理功能最重要的生物现象之一。与突触囊泡相连接的蛋白在控制囊泡释放递质过程中起着关键。突触蛋白粲谝蛔榻峁垢度保守的神经元磷酸化蛋白家族,它们一端与突触囊泡相连接,一端连接细胞骨架。大量研究证实ü姿峄作用引起囊泡与细胞骨架分离,进而促进囊泡中神经递质的释放【】。【】。峁贡J厍械腟位点残基磷酸化控制囊泡与细胞骨架连接【】。【】。依赖性蛋白激酶晕坏磷酸化起主要作用,而且彩巧经元中钗7岣坏牡孜镏弧俊俊因而,我们研究目的是了解和调节神经递质释放是否与鸬膕磷酸化水平有关。研究论灭
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