文档介绍：第 43 卷 第 9 期北    京    林    业    大    学    学    报 Vol. 43，No. 9
2021 年 9 月 JOURNAL  OF  BEIJING  FORESTRY  UNIVERSITY Sep.，2021
 
DOI:−
松材线虫效应因子基因筛选及Bx-Hh-grl功能研究
曹淑可1      零雅茗1,2      吴    昊3,4      王佳楠1      夏    蕤1     
张    悦1      李丹蕾1,2      姜生伟3,4      王    峰1,4
(1. 东北林业大学林学院，黑龙江省外来林木病虫害监测与防控重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150040；2. 十万大山国家级自然
保护区管理局，广西 防城港 535500；3. 辽宁省林业和草原局有害生物防治检疫工作站，辽宁 沈阳 110001；
4. 沈阳工学院，辽宁省危险性林业有害生物防控重点实验室，辽宁 沈阳 110001)
摘要:【目的】通过对松材线虫效应因子基因的克隆和功能研究，揭示Bx-Hh-grl对松材线虫致病性的作用，为防治松材线
虫提供理论依据。【方法】用松材线虫Bx1022株系接种黑松，20 d后提取线虫总RNA进行转录组测序，将该转录组设为
松材线虫植食阶段转录组。提取由灰葡萄孢（Botrytis cinerea）培养的Bx1022的总RNA进行转录组测序，将该转录组设
为菌食阶段转录组。比较分析两个转录组，筛选到差异表达基因Bx-Hh-grl。对Bx-Hh-grl编码蛋白质的跨膜结构域和信
号肽进行预测。利用原位杂交检测Bx-Hh-grl表达部位。应用RNAi技术干扰Bx-Hh-grl表达以探究Bx-Hh-grl对松材线
虫致病性的作用。通过Q-PCR验证，确定RNAi效果显著。将经RNAi处理的松材线虫接种3年生黑松枝条，以未经处
理的松材线虫（CK组）和ddH2O（Mock组）处理的黑松作为对照，比较黑松发病情况进而比较不同处理后松材线虫的致
病性差异。【结果】筛选出植食阶段与菌食阶段转录组差异表达基因Bx-Hh-grl，其编码蛋白质具有跨膜结构域和信号
肽。原位杂交试验结果显示Bx-Hh-grl在松材线虫食道腺表达，符合效应因子基因特征。Q-PCR结果显示经RNAi处理
后的松材线虫Bx-Hh-grl表达量下调，RNAi处