实验二革兰氏染色及细菌特殊结构观察(00001).ppt

文档介绍：实验二 革兰氏染色及细菌特殊结构观察

一、实验目的
学****细菌的革兰氏染色原理和方法
了解细菌的特殊形态结构：芽孢、荚膜、鞭毛
二、实验原理
单染色法：只能观察微生物的大小、形状、和细胞排列状况，但不能鉴别微生物以及它的特殊构造等。
复染色法：用两种或两种以上染色液进行染色，有协助鉴别微生物的作用，故也称鉴别染色法。常用的有：革兰氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法等。
G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。
G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。
细菌的特殊形态结构
芽孢：休眠体，不利环境下产生，耐受各种极端环境。
荚膜：多糖，包裹在菌体外围，保护菌体
鞭毛：运动，菌落形态。
三、实验材料
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌（24h培养物）
革兰氏染色液一套
四、实验步骤
革兰氏染色
枯草杆菌的芽孢观察
观看鞭毛、荚膜的示范片
绘图、写实验报告
革兰氏（Gram）染色法
1. 涂片
2. 初染：在做好的涂面上滴加草酸铵结晶紫染液，染1分钟，倾去染液，流水冲洗至无紫色。
3. 媒染：先用新配的路哥氏碘液冲去残水，而后用其覆盖涂面1分钟，后水洗。
4. 脱色：除去残水后，滴加95%酒精进行脱色约15－20秒，后立即用流水冲洗。
5. 复染：滴加番红染色液，染3－5分钟，水洗后用吸水纸吸干。
6. 镜检：观察染色结果并绘图。
枯草杆菌芽孢的观察
细菌鞭毛的观察