文档介绍：菌种传代操作规程
上海好贴卫生用品有限公司菌种传代操作规程
Shanghai Haotie Health Products Co., Ltd. HT SOP QC 03
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版本 A 版
生效日期年月日
菌种传代操作规程
制订/修订者: 日期: 签名:
周培培
复核者: 日期: 签名:
陆莉萍
核准者: 日期: 签名:
陈锋铭
分发部门:
质量保证部 2份
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上海好贴卫生用品有限公司菌种传代操作规程
Shanghai Haotie Health Products Co., Ltd. HT SOP QC 03
1 目的
为了提高对实验用菌种的使用、管理，通过对菌种的传代、保存，从而确保其在实验中的有效性和准确性。
2 范围:
无菌检验、微生物限度检查检验用菌株。
3 内容
传代前将购进菌种及灭菌后的营养琼脂小斜面置于室温放置30分钟，待温度平衡后再移入阳性操作室内。
换好衣服，戴好口罩、手套，用消毒水将手清洗干净。
、三代工作菌种的制备:
从超低温冰箱中取出所需的菌种冷冻管，置于35,40?的水浴中进行解冻1分钟。解冻后，放入生物安全柜内，用冷却后的灭菌接种环从冷冻管中取一环菌液接种于10ml灭菌营养肉汤培养基中，置于30,35?的培养箱内18,24小时，进行增菌培养。〔第二代〕培养后，用冷却的灭菌接种环从增菌液中沾取一环接种于相应的培养基斜面上贴上菌种标签，置于30,35?的培养箱内18,24小时，进行培养。确认符合后置于5?的冰箱内保存。使用时将培养出的斜面用5ml的灭菌生理盐水将斜面上的菌落洗下制成菌悬液使用。〔第三代〕在第三代菌种有效期内进行第四代的接种传代。
第四、五代工作菌种的制备:
从5?的冰箱内取出第三代工作菌种，用冷却的灭菌接种环挑取1个菌落接种于相应的琼脂斜面培养基中，置于30,35?的培养箱内培养18,24小时后，确认符合后置于5?的冰箱内作为第四代工作菌种保存，备用。
接种操作规范
，左手握住菌种斜面，将管口靠近火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒钟，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。右手用无名指、小指及掌部夹住硅胶塞，左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手再轻轻拨开硅胶塞，将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮取少量菌苔，随即