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实验一还原糖含量的测定.docx

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实验一还原糖含量的测定.docx

文档介绍

文档介绍:实验一 还原糖含量的测定
(直接滴定法)
一、目的要求
1、理解直接滴定法测定还原糖的原理及操作要点;
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
二、实验原理
试样在加热条件下,以次***蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),还原糖将溶液中的二价铜还原成氧化亚铜。以后稍过量的还原糖使次甲蓝指示剂褪色,表示终点到达。根据试样溶液消耗体积,计算还原糖量。
三、实验试剂
1、盐酸溶液(1:1,体积比):量取盐酸50mL,加水50mL混匀。
2、碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜 ( CuSO4•5H2O) ***蓝,溶入水中并稀释至1000mL。
3、碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠,溶于水中,再加入4g亚铁***化钾,完全溶解后,用水稀释至1000mL,贮存于带塞的三角瓶中。
4、乙酸锌溶液:,加3mL冰乙酸,加水溶解并稀释至100mL。
5、亚铁***化钾溶液:***化钾,加水溶解并稀释至100mL。
6、葡萄糖标准溶液:℃±2℃干燥2h的纯葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸溶液,并以水稀释至1000mL。。
四、操作步骤
(一)试样处理
∼,置于250mL容量瓶中,加50mL水,摇匀后慢慢加入5mL乙酸锌溶液,混匀放置片刻,加入5mL亚铁***化钾溶液,加水至刻度,混匀,沉淀、静置30min,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,滤液备用。
(二)标定碱性酒石酸铜溶液
,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9mL葡萄糖,控制在2min内加热至沸,趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10mL (甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量
(mg)。
(三)试样溶液预测
,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,控制在2min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加试样溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每两秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积。当样液中还原糖浓度过高时应适当稀释,再进行正式测定,使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时消耗的还原糖标准溶液的体积相近,约在10mL左右。
(四)试样溶液测定
,置于150mL锥形瓶中,加水10mL,加入玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少1mL的试样溶液至锥形瓶中,使在2min内加热至沸,趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定,直至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积,同法平行操作三份,得出平均消耗体积。
五、结果计算
试样中还原糖(以葡萄糖计)的含量为:
A = C•V标
式中:
X—试样中还原糖(以葡萄糖计)含量,g/100g;
A—1