文档介绍：新的超家族。在毒腺转录组中鉴定到了大量低表达的***突变体, 由基因突变、片段的插入/缺失等是这些***突变体产生的重要因素。此外,***的种内可变性与丰富的多肽***导致了蜘蛛毒腺是一个动态变化的***库,蜘蛛多肽***动态变化使蜘蛛在捕食和防御过程中能够快速地适应环境。为了研究海南捕鸟蛛多肽***结构和功能多样性的机制,我们将以第二代高通量测序为基础的转录组学与多肽组学相结合,分析海南捕鸟蛛多肽***的序列特征,并利用膜片钳技术分析了14种蜘蛛多肽***的生物学活性。通过454测序,从海南捕鸟蛛毒腺中获取 249,549条reads序列,reads序列长度范围为40 bp一830bp,平均长度为~328 bp。通过序列对比,52,570条reads序列与己知***序列有高度相似性,占据所有reads的26%;“推测的***”(Putative Toxins)占整个reads的5%;44%的reads为编码细胞相关蛋白序列; “未知功能”的reads序列占整个鉴定的reads的5%;而剩余的未匹配序列占20%。通过生物信息学分析,最终获得了1,136条***前体并归类为90种多肽***,包括18种己知多肽***和72种新发现的***。依据其半胱氨酸框架,多肽***可分为20大类,其中14 类半胱氨酸框架在海南蜘蛛***中首次被发现。此外,高度多样化的蜘蛛***表现出多样的生物学功能,它们相互协作,作用于多种离子通道,有利于蜘蛛的捕食与防御。心脏离子通道在维持正常的心脏电生理活性过程中发挥着重要万方数据的作用,通过调节静息膜电位和兴奋性,参与动作电位的去极化和复极化,决定心肌动作电位的形状和时程。先天性的编码基因突变或药物阻断导致的心肌离子通道功能障碍,不仅可以改变心肌的兴奋性,同时也可以影响心肌动作电位的去极化和复极化,从而导致长QT综合征/短QT综合征、不同类型的心率失常或者其它心脏传导紊乱。所以,心肌离子通道是抗心率失常药物的重要靶标。蜘蛛毒液包含有丰富的多肽***,这些多肽***能高效地、特异地与多种离子通道相结合,在药理学、神经生物学和医学领域有很好的应用前景。但是,蜘蛛***对心肌电生理影响的研究较少。在本研究中, 我们分析了虎纹捕鸟蛛和海南捕鸟蛛的粗毒对新生大鼠心室肌细胞电生理的影响,包括动作电位(AP),电压门控钠离子通道电流(I。。)、瞬时外向钾电流(I。。)、快激活延迟整流型钾电流(I陆)、慢激活延迟整流型钾电流(I。。)、内向整流型钾电流(I。。)和L型钙电流(Ice)。结果表明:100肛g/mL的虎纹捕鸟蛛和海南捕鸟蛛粗毒都能很明显的延长心肌动作电位时程(APDs)。100 ug/mL虎纹粗毒能明显抑制 ±%的I。。电流;±%的II(r总电流;54±% 的I融尾电流和65±%的工。乩电流,但是对工。。、工僦和工。。电流无明显影响。相似地,100 ug/mL海南粗毒能明显阻断工。。电流和 I。乩电流,但对心肌钾离子通道电流(I州、I∽I。。和I。,)无明显影响。蜘蛛粗毒表现出的多种的药理学特性表明:蜘蛛粗毒含有多种心肌离子通道拮抗剂,在心肌离子通道特性的研究和心脏疾病的治疗方万方数据面有很好的应用前景。综上所述,本课题使用转录组学、多肽组学以及膜片钳技术相结合的方法对两种捕鸟蛛***组分进行了一个整体而系统的研究,揭示了两种捕鸟蛛多肽***的分子多样性及其机制。关键词:蜘蛛***,转录组,多肽组,生物活性,分子多样性 IV 万方数据 AB STRACT Spider venom is amixture pounds with diversified biological activities,which are used forcapturing prey and defending against ponents bind to abroad range of cellulartargets withhi曲affinity andselectivityandappear to have remarkable structural spider venoms have been intensively investigated inthepast few decades,venomic strategies have focused on peptides ofhi曲abundance addition plete spider genomes or representative cDNA libraries frustrate researchers interested inmolecular diversity a