文档介绍：分子荧光光谱法实验报告范文文本
分子荧光光谱法实验报告范文文本
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分子荧光光谱法实验报告范文
一、 实验目的
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：激发光谱、发射光谱的测定方法。
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二、 实验原理
原子外层电子汲取光子后，由基态跃迁到激发态，再回到较低能级或许基态时，发射出必定波长的辐射，称为原子荧光。关于分子的能级激发态称为分子荧光，平常所说的荧光指分子荧光。
拥有不饱和基团的基态分子经光照耀后，价电子跃迁产生荧光，是当电子从第一激发单重态S1的最低振动能级回到基态S0各振动能级所产生的光辐射。
(1)激发光谱
是指发光的某一谱线或谱带的强度随激发光波长(或频次)变化的曲线。横坐标为激发光波长，纵坐标为发光相对强度。
激发光谱反应不一样波长的光激发资料产生发光的成效。即表示发光的某一谱线或谱带能够被什么波长的光激发、激发的本事是高仍是低；也表示用不一样波长的光激发资料时，使资料发出某一波长光的效率。荧光为光致发光，适合的激发光波长需依据激发光谱确立——激发光谱是在固定荧光波长下，丈量荧光体的荧光强度随激发波长变化的光谱。获取方法：先把第二单色器的波长固定，使测定的λem不变，改变第一单色器波长，让不一样波长的光照在荧光物质上，测定它的荧光强度，以I为纵坐标，λex为横坐标所得图谱即荧光物质的激发光谱，从曲线上找出λex，，实质上选波长较长的高波长峰。
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(2)发射光谱
是指发光的能量按波长或频次的散布。往常实验丈量的是发光的相对能量。发射光谱中，横坐标为波长（或频次），纵坐标为发光相对强度。
发射光谱常分为带谱和线谱，有时也会出现既有带谱、又有线谱的状况。 发射光谱的获取方法：先把第一单色器的波长固定，使激发的λex不变，改变第二单色器波长，让不一样波长的光扫描，测定它的发光强度，以I为纵坐标，λem为横坐标得图谱即荧光物质的发射光谱;从曲线上找出最大的λem。
(3)荧光强度与荧光物质浓度的关系
用强度为I0的入射光，照耀到液池内的荧光物质时，产生荧光，荧光强度If用仪器测得，在荧光浓度很稀(A<)时，荧光物质发射的荧光强度If与浓度有下边的关系：If=KC。
三、 实验试剂和仪器
试剂：罗丹明B乙醇溶液；1-萘酚乙醇溶液；3,3’-Diethyloxadicarbocyanine iodide：标准溶液，10μg/ml, 20μg/ml,30μg/ml,40μg/ml和未知浓度；蒸馏水；乙
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醇。
仪器：Fluoromax-4荧光分光