益生菌检测方法.doc

文档介绍：附录A
（规范性附录）
测定用培养基
生化试验培养基
蛋白胨 10g；
牛肉膏 10g；
酵母膏 3g；
葡萄糖 10g；
KH2PO4 2g；
NaCl 1g；
琼脂 20g；
蒸馏水 1000ml；
PH值 -。
麦芽汁琼脂培养基
12°Be麦芽汁 1000ml；
KH2PO4 2g；
琼脂 15g。
MRS琼脂培养基：
酪蛋白胨 ；
牛肉浸膏 ；
酵母浸膏 ；
葡萄糖 ；
乙酸钠 ；
柠檬酸二胺 ；
Tween80 ；
K2HPO4 ；
MgSO4·7H2O ；
MnSO4·H2O ；
CaCO3 ；
；
蒸馏水 1000ml；
PH 。
LB培养基：
胰蛋白胨10g；
葡萄糖5g；
酵母浸出物5g；
氯化钠10g；
琼脂 20g；
蒸馏水 1000ml；
。
附录B
（规范性附录）
嗜酸乳酸菌活菌检测方法
材料

恒温培养箱、厌氧罐、超净工作台、分析天平、恒温水浴锅、匀浆器、可调式移液器、便携式高压灭菌锅、pH电极、酒精灯及常规玻璃仪器
：MRS琼脂培养基（）
：采用活菌平板计数法
：称取1ml样品溶于99ml灭菌生理盐水中，充分震荡摇匀，摇匀后依次稀释至一定浓度
：将附录A的培养基于三角瓶中灭菌（15磅、15分钟）,培养基冷却至50℃左右，，倾注培养基，摇匀，凝固后置于厌氧罐。每个样品应不少于3个平板，于恒温培养箱中37℃培养72小时。
：用计数器计算菌落数，有效计数范围30-300个菌落。每ml样品中含乳酸菌数量=每个平板平均菌落数×稀释倍数×10(cfu)
：菌落圆形、白色、周围有透明圈。
不符合上述形态特征的为杂菌并计数。
：每个稀释样至少3个平板，每个平板中菌落均匀，有效计数范围为30-300个。
杂菌计数
杂菌率按公式（1）计算：
M1 =…………………（1）
式中：
M1——样品杂菌率，%；
——杂菌数，亿/g；
——功能微生物的有效活菌数，亿/g。