文档介绍:附录A
(规范性附录)
测定用培养基
生化试验培养基
蛋白胨 10g;
牛肉膏 10g;
酵母膏 3g;
葡萄糖 10g;
KH2PO4 2g;
NaCl 1g;
琼脂 20g;
蒸馏水 1000ml;
PH值 -。
麦芽汁琼脂培养基
12°Be麦芽汁 1000ml;
KH2PO4 2g;
琼脂 15g。
MRS琼脂培养基:
酪蛋白胨 ;
牛肉浸膏 ;
酵母浸膏 ;
葡萄糖 ;
乙酸钠 ;
柠檬酸二胺 ;
Tween80 ;
K2HPO4 ;
MgSO4·7H2O ;
MnSO4·H2O ;
CaCO3 ;
;
蒸馏水 1000ml;
PH 。
LB培养基:
胰蛋白胨10g;
葡萄糖5g;
酵母浸出物5g;
氯化钠10g;
琼脂 20g;
蒸馏水 1000ml;
。
附录B
(规范性附录)
嗜酸乳酸菌活菌检测方法
材料
恒温培养箱、厌氧罐、超净工作台、分析天平、恒温水浴锅、匀浆器、可调式移液器、便携式高压灭菌锅、pH电极、酒精灯及常规玻璃仪器
:MRS琼脂培养基()
:采用活菌平板计数法
:称取1ml样品溶于99ml灭菌生理盐水中,充分震荡摇匀,摇匀后依次稀释至一定浓度
:将附录A的培养基于三角瓶中灭菌(15磅、15分钟),培养基冷却至50℃左右,,倾注培养基,摇匀,凝固后置于厌氧罐。每个样品应不少于3个平板,于恒温培养箱中37℃培养72小时。
:用计数器计算菌落数,有效计数范围30-300个菌落。每ml样品中含乳酸菌数量=每个平板平均菌落数×稀释倍数×10(cfu)
:菌落圆形、白色、周围有透明圈。
不符合上述形态特征的为杂菌并计数。
:每个稀释样至少3个平板,每个平板中菌落均匀,有效计数范围为30-300个。
杂菌计数
杂菌率按公式(1)计算:
M1 =…………………(1)
式中:
M1——样品杂菌率,%;
——杂菌数,亿/g;
——功能微生物的有效活菌数,亿/g。