文档介绍：word
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临床检验根底学实验指导
血液常规检验
一、微量吸管的使用、毛细血管采血、计数板的鉴定与使用
【实验目的】：掌握微量吸管的使用、毛细血管采血、计数板的鉴定、构造与使用。
【实验试剂】：红细胞稀释液、75％乙醇、消毒药棉。
【实验器材】：一次性采血针、计数板、盖玻片、微量吸管、2ml吸管、中号试管、显微镜、小玻璃棒。
【实验原理】：一次性采血针刺破毛细血管后，用微量吸管吸取一定量的血液，稀释一定的倍数，冲入计数池计数一定体积内的细胞的数量。
【实验方法】：一、微量吸管的使用：用抗凝血训练微量吸管的使用。
二、毛细血管采血〔以红细胞计数为例〕：
准备：取清洁枯燥试管一支，加2ml红细胞稀释液。
采血部位选择、按摩→75％乙醇棉球进展刺针部位皮肤消毒→待酒精挥发干〔否如此血流不成滴〕→自指尖腹内侧迅速刺针→擦去第一滴血→准确吸取10ul血液→用无菌干棉球压住伤口止血→用无菌干棉球擦去管尖外围余血后→将血液释放到稀释液底部→回吸上清液2-3次→轻轻混匀。
三、计数板构造与应用
1．计数板构造
外观构造：每块计数板由“H〞××〕覆盖其上时，。
格子构造：计数池长、宽各3mm，平均分成9个大格， mm3四角的四个大方格分别用单线划分成16个中方格，是白细胞计数区域；中央的大方格用双线条划分成25个中方格，每个中方格又用单线划分成16个小方格，其中四角和正中的5个中方格是红细胞计数区域。
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2．计数板的使用：
用清洁枯燥柔软的纱布擦拭计数板与盖玻片→用推盖法从计数板下缘向前平推盖玻片将其盖在计数室上→充分混匀细胞悬液→充池→静置→观察细胞分布情况〔假如严重不匀，应重新充池。〕
【须知事项】：
1．采血部位应选择皮肤完整，不能有烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症。
2．针刺应迅速，深度适宜〔约2－3mm〕。待血液自行流出，擦去第一滴血。
3．微量吸管取血时应将微量吸管管尖侧着插入血滴中央。假如血流不暢，可以左手自采血部位远端向指尖稍压力至血液流出为止。切忌用力挤压，造成组织液混入，影响结果准确性。
4．计数板在使用中勿让手指接触计数池与盖玻片外表，以访油腻污染，致使充液时起泡。
二、血涂片的制作,瑞氏染色
【实验目的】：掌握血片制作方法，瑞氏染色原理与方法。
【实验试剂】：瑞－吉氏复合染液〔Ⅰ液、Ⅱ液〕
【实验器材】：显微镜、载玻片、推玻片、一次性针头、消毒棉球、洗耳球
【实验原理】：细胞的着色既有化学的亲和作用，又有物理的吸附作用，不同的细胞由于其所含化学成分不一样，化学性质各不一样，所以对染料的亲和力也不一样，因此将细胞染成不同的颜色。
【实验方法】：一、瑞一吉氏复合染液配制
Ⅰ液：取瑞特染粉1g，，置洁净研钵中，加少量甲醇〔分析纯〕，研磨片刻，吸出上层染液，再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上层染液。如此连续几次，共用甲醇500ml。收集于棕色瓶中，每天早晚各振摇3
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′共5天，再存放一周，将染液过滤后即可使用。
Ⅱ—〕，取磷酸二氧钾〔无水〕，磷酸氟二钠〔无水〕，加少量蒸馏水溶解，调整PH后，加水至1000ml。
二、血片制作、瑞氏染色方法
准备：取清洁枯燥载玻片，边缘光滑清洁推玻片各一X。
1、制备血涂片：取载玻片→取血1滴于载玻片右端〔〕→左手持载玻片，右手持推玻片→将推玻片放至血滴前沿逐渐后移至血滴沿推片散开后，推玻片与载玻片成30°～35°的夹角以平稳的速度将血液向前推进→枯燥〔手持载玻片末端迅速在空气中挥动枯燥〕。
2、染色：将干透的血涂片放在水平位置→加瑞吉氏复合染液Ⅰ液数滴，以染液覆盖整个血膜为度→～1min→滴加约2倍于Ⅰ液量的Ⅱ液→用洗耳球吹气混匀→染色5－10min→平持玻片用流线型水洗→枯燥→镜检
【须知事项】：
1．严格皮肤消毒。
、血黏度高、推片角度大、速度快如此血膜厚，反之如此血膜薄。
，美兰逐渐氧化为天青，染色效果越好。
4．染液淡，室温低，细胞多如此染色时间长，反之减少染色时间。
5．水洗方法为平持血涂片流线型水缓缓冲洗干净，不要先倒掉染液。
三、白细胞计数〔WBC〕
【实验目的】：掌握白细胞计数的原理、操作方法与结果报告。
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【实验原理】：用白细胞稀释液将全血稀释一定的倍数并破坏红细胞，充入血细胞计数池，显微镜下计数一定体积的白细胞数